補腎壯骨中藥治療糖皮質(zhì)激素性骨質(zhì)疏松的實驗研究.pdf

1、研究背景:
　　 糖皮質(zhì)激素(glucocorticoid,GC)由于其重要而有效的免疫抑制及抗炎效果而被廣泛應(yīng)用于抗移植免疫排斥、自身免疫疾病、感染及腫瘤治療等領(lǐng)域。但是,長時間接受糖皮質(zhì)激素治療的病人,超過50％會發(fā)生骨丟失,它是繼發(fā)性骨質(zhì)疏松也是醫(yī)源性骨質(zhì)疏松最常見的因為,其發(fā)病率僅次于絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松及老年性骨質(zhì)疏松而居第三位,因此,有效防治這一藥源性骨病,是現(xiàn)代醫(yī)學(xué)亟待解決的重要問題。目前,西醫(yī)防治主要應(yīng)用鈣制劑、Vit

2、D、二磷酸鹽、雌激素、降鈣素、甲狀旁腺素等,但存在價格昂貴、副作用多的情況,均不適合長期使用,且遠期療效亦不肯定。近年來隨著糖皮質(zhì)激素性骨質(zhì)疏松在中醫(yī)病機方面認識的加深,以及對中藥調(diào)節(jié)成骨細胞活性的藥物研究,將進一步有助于中醫(yī)治療方案的調(diào)整和改進。
　　 補腎壯骨中藥(仙靈骨葆膠囊)由淫羊藿、生地黃、補骨脂、川續(xù)斷、丹參、知母等幾味中藥組成,其可以促進成骨細胞(osteoblast,OB)的分化及礦化,并能促進骨髓基質(zhì)細胞向OB

3、分化,在基因水平上促進BMP-mRNA及Runx-2基因的表達,從而促進骨形成作用,提高骨密度,改善骨的質(zhì)和量。臨床方面已證實其對絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松有良好治療效果,但目前對防治糖皮質(zhì)激素誘發(fā)的骨質(zhì)疏松尚缺乏證據(jù)。今以糖皮質(zhì)激素性骨質(zhì)疏松癥(glucocorticoid-induced osteoporosis,GIO)為模型,觀察該方對GIO的療效并初步探討其作用機理,以期進一步豐富其防治骨質(zhì)疏松癥的理論和實驗基礎(chǔ)。
　　 目的

4、r>　　 運用骨密度、骨生化指標和骨生物力學(xué)手段來綜合評價補腎壯骨中藥對GIO大鼠的防治作用。
　　 材料和方法:
　　 選用40只3.5月齡雌性SD大鼠隨機分為4組每組10只,即,自由活動對照組(A組),造模組(B組),中藥組(C組)西藥組(D組)；B、C、D組分別皮下注射甲波尼龍(3.5mg/kg.d,9周),建立骨質(zhì)疏松模型。C組造?；A(chǔ)上給予仙靈骨葆膠囊(150mg/kg)灌胃,2次/d,D組在造模基礎(chǔ)上給予阿

5、倫磷酸鈉1.0mg/kg,1次/d,其它兩組給予等量生理鹽水,實驗期9周。9周后測定各組大鼠骨密度(BMD)、骨代謝生化指標及骨生物力學(xué)等指標。
　　 統(tǒng)計方法
　　 所有數(shù)據(jù)采用均數(shù)士標準差((x)±s)表示,SPSS13.0統(tǒng)計軟件分析。各組間比較采用單因素方差分析(One Way-ANOVA),組間差異用LSD法,P<0.05作為有顯著性差異的檢驗標準。
　　 結(jié)果:
　　 1、糖皮質(zhì)激素性骨質(zhì)疏松

6、大鼠模型的建立:
　　 實驗9周后,B組大鼠血清骨形成標志物骨鈣素BGP(0.92±0.31ng/ml vs.1.52±0.45ng/ml),降鈣素CT(170.52±29.67pg/ml vs.211.27±32.31pg/ml)較A組降低(P<0.05),血清骨吸收標志物TRACP(27.67±7.99 U/L vs.13.76±2.31U/L)較A組升高(P<0.01):血清Ca(0.98±0.17 mmol/L vs.1

7、.27±0.25mmol/L)較A組降低(P<0.01),血清雌二醇(15.47±2.98pg/ml vs.21.33±4.17pg/ml)較A組降低(P<0.05),血清P(1.27±0.25 mmol/L vs.1.84±0.50 mmol/L)兩組間無顯著性差異(P>0.05)；股骨BMD)(0.246±0.012g/cm2 vs.0.263±0.012g/cm2)、骨礦含量(0.42g±0.44g)較A組下降(P<0.05),第

8、5腰椎BMD(0.240±0.013g/cm2 vs.0.572±0.011g/cm2)及骨礦含量(0.08g±0.27g)較A組下降(P<0.05)；股骨三點彎曲實驗最大載荷(124.55±14.65 N vs.150.04±19.85 N)及剛度(176.39±36.16 N/mm vs.260.11±71.44 N/mm)較A組下降(P<0.05),第5腰椎壓縮實驗最大載荷(217.43±22.27 N vs.268.67±15.

9、55 N)及剛度(229.84±80.90N/mm vs.322.30±38.54 N/mm)較A組下降(P<0.05)。表明糖皮質(zhì)激素骨質(zhì)疏松模型建立成功。
　　 2、補腎壯骨中藥對大鼠糖皮質(zhì)激素性骨質(zhì)疏松模型的作用:
　　 (1)體重變化:實驗第3周B、C、D組大鼠體重與A組比較有顯著性差異(P=0.000),B、C、D組大鼠體重較A組顯著降低(P=0.000),B、C、D三組間大鼠體重無顯著差異(P>0.05)。<

10、br>　　 (2)骨密度測定:四組間股骨及腰椎骨密度有顯著差異(F=3.528,5.820；P=0.008,0.003),B組低于A組(P=0.008,0.001)；C、D組高于B組(P=0.047,0.007:0.008,0.001),C、D兩組間比較無顯著性差異(P=0.453,0.567)；四組間股骨及腰椎骨礦含量有顯著差異(F=7.869,13.088；P=0.000,0.000),B組低于A組(P=0.000,0.000)；

11、C、D組高于B組(P=0.001,0.001；0.000,0.000),C、D兩組之間比較無顯著性差異(P=0.851,0.936)。
　　 (3)骨生化指標測定:反映骨形成指標BGP、CT及血清Ca、E2、TRACP四組間有差異(F=6.542,4.406,18.057,5.880,6.228；P=0.001,0.010,0.000,0.002,0.002),其中B組BGP、CT、TRACP、Ca、E2低于A組(P=0.008

12、,0.004,0.004,0.003,0.002)；C組BGP、CT、Ca、E2高于B組(P=0.003,0.012,0.005,0.009)；D組TRACP高于B組(P=0.003),與A組無顯著差異(P=0.006)。血清P四組間無顯著性差異(P>0.05).
　　 (4)骨生物力學(xué)性能測定:主要反映松質(zhì)骨力學(xué)特性的腰椎壓縮實驗最大載荷和剛度四組間有先顯著差異(F=12.227,4.397；P=0.000,0.010),B組

13、低于A組(P=0.000,0.004)；C、D組高于B組(P=0.000,0.000；0.005,0.007),C、D兩組間比較無顯著性差異(P=0.896.0.953)；反映皮質(zhì)骨力學(xué)特性的股骨三點彎曲實驗最大載荷和剛度四組間有先顯著差異(F=5.044,4.967；P=0.005,0.006),B組低于A組(P=0.008,0.003；0.005,0.003)；C、D組高于B組(P=0.012,0.007),C、D兩組間比較無顯著性