HnRNP A2-B1在非小細(xì)胞肺癌早期診斷中的應(yīng)用研究.pdf

1、目的
　　 肺癌是人類最常見的惡性腫瘤之一,也是世界上病死率最高的惡性腫瘤。在過去的10年中,肺癌發(fā)病率以每年遞增22%的速度上升。中國腫瘤防治研究辦公室2006年公布的我國肺癌發(fā)病現(xiàn)狀和未來趨勢顯示,2000年～2005年,我國肺癌的發(fā)病人數(shù)與上個5年相比增加12萬人。2009年美國肺癌的新發(fā)病例估計有219440例(男性116090例,女性103150例),死亡159390例(男性88900例,女性70490例),只有15%

2、的患者在確診肺癌手術(shù)后能生存5年或以上。國內(nèi)外大樣本統(tǒng)計分析顯示,Ⅰ期肺癌的診斷率僅為10%,Ⅱ期肺癌肺野或肺門淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移占10%,而臨床初次診斷為肺癌時已屬Ⅲ期或Ⅳ期病例者達(dá)80%左右,即大部分患者因發(fā)現(xiàn)和診斷較晚而失去最佳治療時機。雖然近10年來治療手段不斷改善和進(jìn)步,生存率有所提高,但死亡率仍居高不下,總的5年生存率仍然很低,其根本原因是早期診斷率低。因此,提高早期診斷率才是改善治療效果,提高生存率,降低病死率的關(guān)鍵所在。

3、　　 目前相關(guān)研究提示,在肺癌發(fā)生早期或癌前階段HnRNPA2/B1(核內(nèi)不均一核糖核蛋白A2/B1)可廣泛表達(dá)于惡性病變和增殖細(xì)胞中,肺組織上皮細(xì)胞HnRNPA2/B1表達(dá)陽性的細(xì)胞發(fā)生微衛(wèi)星改變(micro-satellite,alteration,MA)和雜合性缺失(lossofheterozygosity,LOH)等導(dǎo)致細(xì)胞癌變分子事件的頻率比HnRNPA2/B1表達(dá)陰性的細(xì)胞高3倍。HnRNPA2/B1是HnRNPs(核內(nèi)不

4、均一核糖核蛋白)的核心構(gòu)成部分,分子量為32～40kDa。HnRNPA2/B1在人體各個組織和器官中均有少量表達(dá),但是在腫瘤組織中常表現(xiàn)為高表達(dá),例如乳腺癌,結(jié)腸癌,肝癌,胃癌,食管癌等。HnRNPA2/B1在正常的支氣管上皮細(xì)胞中表達(dá)水平極低,甚至不表達(dá),但在慢性吸煙者中心氣道和化生上皮組織中表達(dá)明顯升高。對疑似肺癌的患者痰液檢查發(fā)現(xiàn),HnRNPA2/B1呈高表達(dá)者65%在1年內(nèi)發(fā)展為肺癌。目前的研究結(jié)果顯示,在吸煙患者的中心氣道中,

5、表面正常的肺組織,HnRNPA2/B1經(jīng)常表現(xiàn)為高表達(dá)。而且,一個基于目前的研究提出常規(guī)的化療并不能影響HnRNPA2/B1的表達(dá),可能HnRNPA2/B1只是肺癌的起始原因,而非促進(jìn)因素。
　　 因此說明HnRNPA2/B1分子可能是肺癌早期診斷的標(biāo)志物。而且越來越多的證據(jù)表明,HnRNPA2/B1作為肺癌早期診斷的腫瘤標(biāo)志物與目前常用的方法相比,可能具有更高的靈敏度和特異性,可較大提前診斷時間,做到肺癌的早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早治

6、療。鑒于HnRNPA2/B1的上述特點,本研究目的是進(jìn)一步檢測HnRNPA2/B1在肺良惡性病變及病變旁支氣管粘膜中的表達(dá)狀況,以探討其在肺癌早期診斷中的應(yīng)用價值。
　　 方法
　　 本研究選取中國醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院胸外科2010年1月～2010年12月手術(shù)治療的43例肺癌和21例肺良性腫物患者作為研究對象。肺癌患者術(shù)后分別取癌組織,癌旁支氣管粘膜和距腫瘤大于5cm正常肺組織作為研究標(biāo)本;肺良性病變患者術(shù)后分別取病變組

7、織和距病變大于5cm正常肺組織作為研究標(biāo)本。常規(guī)石蠟包埋和-70℃超低溫冰箱保存。分別應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法和Western-blot方法檢測上述組織標(biāo)本的表達(dá)情況。
　　 統(tǒng)計分析采用x2檢驗(P＜0.05有統(tǒng)計學(xué)意義)及多個樣本率比較的x2分割法(P＜0.0125有統(tǒng)計學(xué)意義)。
　　 結(jié)果
　　 1、HnRNPA2/B1在肺癌組織表達(dá)較高(81.4%),顯著高于正常組織(23.3%),兩者之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義

8、(P＜0.0125)。
　　 2、與表達(dá)率較低的正常組織相比,癌旁支氣管粘膜也表現(xiàn)出高表達(dá)(74.4%),兩者之間有差異(P＜0.0125)。
　　 3、HnRNPA2/B1在肺良性腫物中表達(dá)不明顯(11.5%),與HnRNPA2/B1表達(dá)陽性率較高的肺癌組織相比,兩者之間表達(dá)差異顯著(P＜0.0125)。
　　 4、HnRNPA2/B1在鱗癌和腺癌中表達(dá)率較高,分別為87.5%和76.0%,兩者之間無統(tǒng)計學(xué)差異

9、(P＞0.05);Ⅰ+Ⅱ期肺癌(96.30%)比Ⅲ+Ⅳ期肺癌(56.3%)表達(dá)率高,兩者之間有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);HnRNPA2/B1表達(dá)與患者性別,年齡,吸煙,病理類型,分化程度,及淋巴結(jié)有無轉(zhuǎn)移均無相關(guān)性。
　　 結(jié)論
　　 1、HnRNPA2/B1在非小細(xì)胞肺癌癌組織中高表達(dá)。在正常肺組織及良性腫瘤組織中表達(dá)較低,甚至不表達(dá)。肺癌TNM分期早期比中晚期表達(dá)率高。
　　 2、HnRNPA2/B1在癌旁

10、支氣管粘膜組織中高表達(dá),顯著高于正常肺組織。
　　 3、HnRNPA2/B1在肺癌組織表達(dá)高于良性腫瘤組織。HnRNPA2/B1在肺良性病變及正常肺組織中表達(dá)較低。
　　 4、HnRNPA2/B1可能是支氣管粘膜癌前病變和早期肺癌的分子生物學(xué)標(biāo)志物之一。經(jīng)纖維支氣管鏡檢測肺癌組織及癌旁支氣管粘膜組織中HnRNPA2/B1的表達(dá),可能會有效提示肺癌的發(fā)生,有利于發(fā)現(xiàn)早期肺癌患者,有效的提高肺癌早期診斷率,增加手術(shù)機會,降低