異病同證之肝陽化風(fēng)證的蛋白質(zhì)組學(xué)研究及PRX3在肝陽化風(fēng)證的表達及意義.pdf

1、目的:通過研究腦出血，腦梗塞，頸椎病，帕金森病肝陽化風(fēng)證（異病同證）患者及健康人外周血的蛋白質(zhì)組學(xué)研究，并進行相關(guān)蛋白質(zhì)驗證，以探討異病同證之肝陽化風(fēng)證的分子本質(zhì)內(nèi)涵。 方法分別分離出腦出血，腦梗塞，頸椎病，帕金森病肝陽化風(fēng)證各組患者及健康人外周血單個核細胞，采用二維凝膠電泳分離各組總蛋白質(zhì)，獲得差異表達蛋白質(zhì)，制備各組蛋白質(zhì)組表達圖譜，PDQuest軟件分析，并通過基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時間質(zhì)譜（MALDI-TOF）和數(shù)據(jù)庫

2、對差異表達的蛋白質(zhì)分析鑒定。選擇肝陽化風(fēng)證有意義的蛋白進行驗證，采用逆轉(zhuǎn)錄.多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（RT-PCR）法檢測正常組及肝陽化風(fēng)證組PRX3基因表達水平。 結(jié)果 1.建立了腦出血，腦梗塞，頸椎病，帕金森病四病之肝陽化風(fēng)證患者及健康人外周血單個核細胞蛋白質(zhì)表達圖譜；腦梗塞肝陽化風(fēng)證組與健康對照組比較有21個相同表達的蛋白質(zhì)，17個差異蛋白表達，其中13個蛋白質(zhì)較健康對照組表達下調(diào)，4個較健康對照組表達上調(diào)，腦出血肝陽化風(fēng)證

3、組與健康對照組比較有22個相同表達的蛋白質(zhì)，21個差異蛋白表達，其中18個蛋白質(zhì)較健康對照組表達下調(diào)，3個較健康對照組表達上調(diào)，帕金森病肝陽化風(fēng)證組與健康對照組比較有23個相同表達的蛋白質(zhì)，20個差異蛋白表達，其中18個蛋白質(zhì)較健康對照組表達下調(diào)，2個較健康對照組表達上調(diào)，頸椎病肝陽化風(fēng)證組與健康對照比較有17個相同表達的蛋白質(zhì)，15個差異蛋白表達，其中13個蛋白質(zhì)較健康對照組表達下調(diào)，2個蛋白質(zhì)較健康對照組表達上調(diào)，而四病的肝陽化風(fēng)證

4、共有5個表達相同的蛋白質(zhì)，且表達均較健康對照組表達下調(diào)。鑒定出的蛋白質(zhì)根據(jù)涉及的功能進行分類：包括細胞骨架蛋白、代謝酶類、細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白、抗氧化蛋白、血液蛋白等。 2.差異蛋白驗證結(jié)果：RT-PCR法證實PRX3在各組的表達水平與2-DE結(jié)果一致：與健康對照組表達比較，腦出血，腦梗塞，頸椎病，帕金森病四病的肝陽化風(fēng)證PRX3表達量均明顯下調(diào)（p<0.05），而四病各組間PRX3表達無差異（p>0.05）。 結(jié)論

5、 1.初步建立了腦出血，腦梗塞，頸椎病，帕金森病肝陽化風(fēng)證患者及健康人對照組的外周血單個核細胞蛋白質(zhì)表達圖譜。 2.腦出血，腦梗塞，頸椎病，帕金森病四病的肝陽化風(fēng)證（異病同證）患者具有相同及差異表達的蛋白質(zhì)，提示異病同證既有證的共同的物質(zhì)基礎(chǔ)（相同的蛋白質(zhì)表達），又有疾病本身不同的特點（差異蛋白質(zhì)表達）。 3.PRX3的RT-PCR驗證結(jié)果與2-DE結(jié)果一致，提示蛋白質(zhì)組學(xué)檢測的準(zhǔn)確性，可靠性。 4.異病同證之肝