血紅素蛋白質(zhì)、血紅素及原卟啉IX的電化學行為研究.pdf

1、血紅素蛋白質(zhì)是一類以血紅素為輔基的重要蛋白質(zhì)，同很多生命現(xiàn)象密切相關，在生命體的諸多生命過程中發(fā)揮著重要的作用，如細胞色素c的電子傳遞，血紅蛋白的儲存和運輸氧等。血紅素蛋白質(zhì)的定性定量分析是生命科學中經(jīng)常涉及的內(nèi)容，也是臨床檢驗中診斷疾病和檢驗治療效果的重要指標。血紅素是卟啉類化合物的典型代表，作為一類天然的紅色色素和鐵卟啉，血紅素在食品加工及鐵缺乏癥治療等方面發(fā)揮著顯著的作用。原卟啉IX是血紅素的重要組成部分，其含量的測定對卟啉類疾病

2、的預防和治療具有重要的臨床意義。
　　 本論文采用單掃描極譜法對血紅素蛋白質(zhì)進行深入研究，建立了一種可對血紅素蛋白質(zhì)進行有效鑒別和檢測的新型電分析方法。該方法是基于其血紅素輔基在羥胺存在下于電極表面定量轉變?yōu)楣策鳬X基團，進而發(fā)生還原而建立起來的。方法選擇性好、靈敏度高。論文同時對血紅素和原卟啉IX的電化學行為進行了較為詳細的研究，建立了檢測相應物質(zhì)的新型電分析方法。
　　 論文研究工作分為三部分，主要內(nèi)容如下：

3、>　　 1.血紅素蛋白質(zhì)在滴汞電極表面的一個新化學反應。在pH 9.6的NaHCO3-Na2CO3與羥胺介質(zhì)中，細胞色素c及其他血紅素蛋白質(zhì)于- 0.89 V(vs. SCE)附近可得到一靈敏還原波，其二階導數(shù)波高與血紅素蛋白質(zhì)在一定濃度范圍內(nèi)呈良好的線性關系。不含血紅素輔基的蛋白質(zhì)在該底液中不產(chǎn)生該峰。機理研究表明：該還原峰是由與滴汞電極表面氧化的汞離子有關的一個特殊化學反應引起的，且該化學反應只有在羥胺存在前提下才能發(fā)生。該方法

4、選擇性好、靈敏度佳，可用于血紅素蛋白質(zhì)的定性定量分析，這為生命科學領域對該類蛋白質(zhì)的深入研究提供了一種新的途徑。
　　 2. 鹽酸羥胺存在下氯化血紅素的靈敏極譜還原波。氯化血紅素在pH 9.7的碳酸鹽與鹽酸羥胺底液中于- 0.89V (vs. SCE) 附近產(chǎn)生一新的靈敏還原峰，二階導數(shù)波高與其濃度在7.7×10-9 ~ 3.1×10-6mol·L-1范圍內(nèi)呈線性關系，r = 0.998，檢測限為3.8×10-9 mol·L-1

5、。探討了該極譜波的產(chǎn)生機理，結果表明，電極表面生成的汞離子在羥胺共存時能取代血紅素中心金屬離子鐵生成汞卟啉IX化合物，該化合物還原形成峰P。其中羥胺對取代反應的發(fā)生起著關鍵作用。非鐵卟啉化合物不產(chǎn)生該峰。通過對體系電毛細管曲線等研究，證實該波為一具有吸附性質(zhì)的不可逆還原波。
　　 3. 原卟啉IX的單掃描極譜法測定。在NaHCO3 - Na2CO3(pH = 9.6)的緩沖溶液中原卟啉IX于- 1.06V(vs.SCE)產(chǎn)生一靈