Ad-PUMA用于胰腺癌基因治療的可行性研究.pdf

1、北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院博士學(xué)位論文Ad-PUMA用于胰腺癌基因治療的可行性研究姓名：裴煒申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：腫瘤學(xué)指導(dǎo)教師：趙平;林晨20090501北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院博士研究生學(xué)位論文胞( M I A P a C a ．2 ，P 3 ，P A N C l ，S W l 9 9 0 ) 中均可高效率表達(dá)。將A d ．P U M A 導(dǎo)入細(xì)胞后，C C K ．8 法證實(shí)P U M A 過(guò)表達(dá)可抑制胰腺癌細(xì)胞增殖，促進(jìn)

2、凋亡，其促凋亡作用較A d ．p 5 3 強(qiáng)大、快速。通過(guò)D N A L a d d e r 法、核D A P I 染色法、流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)顯示，腺病毒介導(dǎo)的P U M A 基因( A d ．P U M A ) 感染人胰腺癌細(xì)胞后可誘導(dǎo)凋亡發(fā)生。R T ．P C R 及W e s t e m b l o t 等方法證實(shí)A d ．P U M A 感染M I AP a C a - 2 細(xì)胞6 小時(shí)后即有表達(dá)，可促進(jìn)C 豁p a S e ．3

3、的活化并誘導(dǎo)P A I 心的剪切。在M I A P a C a 0 2 和P A N C l細(xì)胞中證實(shí)A d - P U M A 聯(lián)合化療藥( c D D P ，5 F u ，G e m z e r ) 對(duì)胰腺癌細(xì)胞的增殖抑制作用具有協(xié)同效應(yīng)，可能是通過(guò)誘導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)P U M A 表達(dá)升高而發(fā)揮作用。裸鼠M n P a C a ．2 移植瘤實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明瘤內(nèi)注射A d —P U M A 可明顯抑制M i aP a C a - 2 細(xì)胞移植瘤

4、的生長(zhǎng)，并且與化療藥聯(lián)合應(yīng)用具有顯著性差異。結(jié)論外源P U M A 導(dǎo)入具有明顯的胰腺癌細(xì)胞生長(zhǎng)抑制作用，這種作用是通過(guò)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡介導(dǎo)的，對(duì)細(xì)胞周期無(wú)明顯影響。外源P U M A 導(dǎo)入誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡可能是通過(guò)激活化C a s p a s e 3 并誘導(dǎo)P A R P 剪切失活來(lái)誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞的凋亡。在胰腺癌細(xì)胞系M i a P a C a - 2 和P A N C l 中，小劑量A d ．P U M A 與化療藥( c D D P ，5