番茄紅素對實驗大鼠肺纖維的干預(yù)作用及其機理初探.pdf

1、【目的】本課題在前期研究工作的基礎(chǔ)上，對番茄紅素的測定方法作出一定改進，以建立測定番茄紅素油樹脂中番茄紅素含量的簡便易行的方法。對大鼠實驗性肺纖維化進行干預(yù)治療，以進一步挖掘番茄紅素的潛在應(yīng)用價值；在得到較明確結(jié)果的基礎(chǔ)上，對其在免疫學(xué)、氧化/抗氧化機制方面的作用機理進行初步研究；同時對提倡人們合理健康飲食預(yù)防肺纖維化，作出理論及實驗方面的鋪墊和準備。 【方法】采用本教研室研究的改良有機溶劑浸提法從市售新鮮番茄中提取番茄紅素，用

2、分光光度法和高效液相層析法進行定性及定量分析；對番茄紅素定量測定分光光度法進行改進，以第三吸收峰525nm為測定波長，消除β-胡蘿卜素等干擾物對測定的影響。 60只SD大鼠，雌雄不限，隨機分為正常對照組(C組)、模型組(M組)和番茄紅素干預(yù)組(L組)，每組各20只。M組和L組采用抗腫瘤藥物博萊霉素經(jīng)氣管注射建立大鼠肺纖維化模型，造模當(dāng)日起L組每天用自提的番茄紅素灌胃，3、7、14和28d處死大鼠采集肺組織及血漿標本，測定肺系數(shù)，

3、肺組織作常規(guī)固定后進行HE和Masson染色，對肺泡炎及肺纖維化程度作出評價。 對肺組織切片進行免疫組化染色，鏡下觀察模型組與番茄紅素干預(yù)組TNF-α及TGF-β1的表達情況；測定血漿TNF-α、NO、MDA含量及SOD活性。比較各組實驗大鼠上述指標的差異，對番茄紅素干預(yù)大鼠實驗性肺纖維化的作用機理進行初步探討。 【結(jié)果】共提取約165ml番茄紅素樣品，以高效液相層析法定量測定結(jié)果為準，番茄紅素濃度約為1.8mg/ml，

4、即總共提取了約297mg番茄紅素。對番茄紅素測定方法進行了一定程度的改進，結(jié)果顯著低于485nm的測定值(P＜0.01)。 成功建立起大鼠實驗性肺纖維化模型；與模型組相比，番茄紅素干預(yù)組肺系數(shù)降低(14、28d：P＜0.05)，肺泡炎及肺纖維化均有一定程度的減輕(前者3、7、14d，后者14、28d：P＜0.05)。 免疫組化結(jié)果方面，番茄紅素干預(yù)組肺組織TGF-β1和TNF-α的表達在3、7d低于模型組；番茄紅素干預(yù)組

5、各時間段血漿TNF-α、NO含量均低于模型組，7、14、28d干預(yù)組TNF-α含量顯著低于模型組(P＜0.01)，而NO含量則在14d顯著低于模型組(P＜0.05)；氧化/抗氧化指標方面，番茄紅素干預(yù)組血漿MDA含量低于模型組，3d有顯著性差異(P＜0.05)，而血漿SOD活性高于模型組，28d有顯著性差異(P＜0.05)。 【結(jié)論】成功提取出番茄紅素，為下一步研究作好了準備；對其定量測定方法進行了一定程度的改進。 番茄