RANTES在哮喘大鼠肺組織的表達及維生素D的干預(yù)作用.pdf

1、中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文RANTES在哮喘大鼠肺組織的表達及維生素D的干預(yù)作用姓名：陳偉偉申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：臨床醫(yī)學(xué)；兒科學(xué)指導(dǎo)教師：蔡栩栩201204代替OVA進行致敏和激發(fā)；末次激發(fā)后24小時內(nèi)取材，對各組大鼠進行氣道平滑肌細(xì)胞(airwaysmoothmusclecells，ASMCs)原代培養(yǎng)；肺組織石蠟包埋切片后行HE染色觀察病理變化；ELISA法檢測各組支氣管肺泡灌洗液(bronchoalveolarlavageflu

2、id，BALF)中趨化因子RANTES的含量；免疫組化方法測定各組肺組織RANTES蛋白的表達情況：實時定量PCR測定各組肺組織及ASMCs中RANTESmRNA的表達。另取哮喘組大鼠進行ASMCs的原代培養(yǎng)，培養(yǎng)至46代時，將長至80％融合的細(xì)胞用含01％dx牛血清的培養(yǎng)基進行同步化處理24小時；然后分為兩組進行1，25(OH)2D3的干預(yù)，一組在相同的時間點加入不同濃度的1，25(OH)2D3，濃度分別為(0001nM、001nM、

3、O1nM、lnM、10nM、100nM)，另一組細(xì)胞在不同時間點(相對腫瘤壞死因子進行刺激時間分別為1h，0h，6h，12ll，or18h)加入相同濃度的l，25(OH)2D3；ELISA法檢測培養(yǎng)基上清中ASMCs分泌的黜蝌TES的含量。結(jié)果1病理改變：哮喘組大鼠氣道炎癥反應(yīng)最明顯，出現(xiàn)炎癥細(xì)胞侵潤、氣道狹窄變形及平滑肌的斷裂，各個干預(yù)組有不同程度的緩解。2肺組織RANTES蛋白的表達：哮喘組大鼠肺組織中RANTES蛋白的表達最強，光

4、密度值為：04352q：0087；維生素D組為：0300士0048；普米克組為：0248士00214；普米克聯(lián)合維生素D治療組的表達進一步下降為：01654士00219，各干預(yù)組與哮喘組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(PO05)；聯(lián)合組與普米克組相比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(PO05)。3RANTESmRNA的表達：肺組織中：哮喘組相對擴增倍數(shù)為33695士0592，維生素D組為213110919，與哮喘組相比無意義(產(chǎn)O377)；普米克組為17488

5、士0399，與哮喘組相比無意義(P=0059)；聯(lián)合治療組為148040304，與哮喘組相比有意義(P=0021)。ASMCs中；正常組RANTES相對擴增倍數(shù)為：1526士03778，哮喘組為：4289士0881，與正常組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(PO05)；維生素D組為3222a：0499，普米克組為2013士0546，聯(lián)合治療組為15310735，各干預(yù)組與哮喘組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(PO05)。4細(xì)胞水平上的干預(yù)顯示，在一定濃度范圍