生長抑素受體亞型SSTR3在胃癌中的作用.pdf

1、目的：檢測生長抑素受體亞型SSTR3在胃癌和胃癌細胞系中的表達，初步闡述胃癌中SSTR3的表達及其意義。 方法：運用免疫組化法檢測胃癌組織中SSTR3蛋白的表達；運用免疫熒光化學法和免疫印跡法Westernblot檢測人胃癌細胞系SGC7901、AGS、MKN45和永生化胃上皮細胞系GES中SSTR3蛋白的定位和表達；運用RT-PCR法檢測SSTR3mRNA的表達。 結果：SSTR3蛋白定位于胃癌細胞膜，在正常胃組織則彌

2、散分布于胃粘膜層的細胞胞漿和粘膜下基質；與40例正常胃組織呈高表達相比，SSTR3蛋白在20例胃高分化腺癌中表達明顯降低，20例胃低分化腺癌中則幾乎未見表達；胃上皮細胞和胃癌細胞系SSTR3mRNA和蛋白的表達也呈現(xiàn)正常→高分化→低分化逐漸降低趨勢。 結論：SSTR3基因和蛋白在胃癌組織及胃癌細胞系中表達明顯低于正常胃組織及胃上皮細胞系，提示SSTR3可能與胃癌的生長和分化有關。 目的：觀察生長抑素類似物octreoti

3、de對胃癌細胞增殖和凋亡的影響，探討生長抑素受體亞型SSTR3在介導生長抑素引起胃癌細胞增殖和凋亡變化中的作用。 方法：運用四氮唑藍(MTT)法檢測octreotide對胃癌細胞系SGC7901、AGS和MKN45以及永生化胃上皮細胞系GES細胞增殖的影響；運用流式細胞儀檢測細胞的凋亡率；并使用SSTR3特異性抗體進行抗體干預實驗。 結果：(1)Octreotide可不同程度地抑制胃癌細胞系SGC7901、AGS、MKN

4、45和胃上皮細胞系GES的增殖，其效應與藥物劑量呈明顯的正相關，但在不同的細胞系抑制程度存在顯著的差異性，對于缺乏SSTR3表達的MKN45細胞，octreotide的抑制作用明顯弱于表達SSTR3的SGC7901細胞和GES細胞，低表達SSTR3的AGS細胞介于二者之間；(2)Octreotide可有效地誘導SGC7901細胞和GES細胞發(fā)生凋亡，對AGS細胞和MKN45細胞的凋亡誘導作用較差；(3)使用SSTR3特異性抗體對SGC7

5、901進行了抗體干預實驗，結果顯示聯(lián)合使用SSTR3抗體時，octreotide對胃癌細胞的增殖抑制作用減弱，誘導凋亡作用喪失。 結論：生長抑素類似物octreotide通過SSTR3的介導可有效地抑制胃癌細胞的增殖和誘導胃癌細胞的凋亡。 目的：生長抑素及其類似物抑制腫瘤細胞的生長主要是由腫瘤組織中生長抑素受體介導的。但對于大多數(shù)胃癌，由于缺乏生長抑素受體的表達，生長抑素及其類似物并不起作用。本實驗擬通過基因轉移使原來不

6、表達SSTR3基因的胃癌細胞再表達，為生長抑素和SSTR3基因治療胃癌提供有效途徑。 方法：從永生化胃上皮細胞系GES中提取總RNA，經RT-PCR擴增出SSTR3基因，并構建真核表達載體，轉染不表達SSTR3的胃癌細胞系MKN45，以MTT法、流式細胞儀和電鏡等觀察轉染SSTR3基因前后使用octreotide對胃癌細胞增殖和凋亡的影響。 結果：克隆的SSTR3基因測序正確；構建的真核表達載體pcDNA3.1(+)-S