大鼠白色念珠菌肺炎顆粒酶變化及顆粒酶與IFN-γ、IL-2相關性研究.pdf

1、目的:檢測大鼠白色念珠菌肺炎不同時期血清顆粒酶(Oranzyme)及健康對照組相同時間血清顆粒酶的表達水平，并同步測定血清中與細胞免疫密切相關的細胞因子γ-干擾素(IFN-γ)和白細胞介素-2(Ⅱ-2)的含量變化。分別比較顆粒酶和肺部炎癥改變相關性及顆粒酶與IFN-Y，Ⅱ-2的相關性。初步探討大鼠白色念珠菌肺炎顆粒酶表達特點以及其同IFN-Y，Ⅱ-2之間的關系，推測顆粒酶在大鼠白色念珠菌肺炎發(fā)展變化過程中可能起到的作用及其意義。方法:首

2、先選用健康雄性SD大鼠(150g-180g)40只，隨機分為1，3，7，11d組，各組10例作為模型組，同時選用同等條件SD大鼠40只，隨機分為1，3，7，11d組，各組l0例作為對照組。其次制備白色念珠菌肺炎動物模型，將大鼠腹腔注射氯胺酮(100mg/Kg體重)麻醉后，從氣管注入白色念珠菌0.4ml，(每0.1ml約106CFU/ml，)。之后各組實驗對象在無菌操作下腹腔注射麻醉氯胺酮后將大鼠的左肺取下，取1cm×1cm組織塊在無菌條

3、件下剪碎，置入沙保弱瓊脂培養(yǎng)基，在35度下培養(yǎng)48小時，計數白色念珠菌的量。右肺組織做石蠟包埋切片HE染色鏡下觀察肺組織病理改變，并參照Szapiel等方法評分行肺泡炎嚴重程度積分，同時心室腔穿刺抽血，經離心后取血清，采用雙抗體夾心ABC-EI,ISA法測定血清顆粒酶、IFN-Y、Ⅱ-2水平。應用SPSS13.0統計軟件進行統計學分析與統計學圖表繪制，(α=0.05，P<0.05)有統計學意義。結果:1、肺組織病理學改變:各對照組均無病

4、理改變。大鼠白色念珠菌肺炎模型組第1天有輕度肺泡炎改變，第3，7天肺泡炎程度較重，血管擴張，充血出血，肺泡壁增厚，肺泡腔及肺泡壁有較多炎癥細胞浸潤，病變區(qū)域肺泡萎縮。第11天肺泡炎程度有明顯好轉。與對照組比較，1、3、7天肺泡炎嚴重程度積分模型組明顯增高(P均<0.05)，11天兩組比較無明顯差別(P>0.05)，模型組肺泡炎嚴重程度積分3d>7d>1d>11d(P均<0.05)。2、肺組織細菌培養(yǎng)48小時，正常對照組無白色念珠菌生長；

5、模型組1、3、7、11天組可見白色念珠菌生長，以1、3、7天生長明顯，11天模型組同對照組比較無統計學意義(P>0.05)。3、白色念珠菌肺炎模型組第1、3、7天顆粒酶，IFN-Y，Ⅱ-2值較正常對照組增高，兩組存在顯著性差異(P<0.05)。11天模型組與對照組比較無顯著差異(P>0.05)。組內比較3d>7d>1d>11d(P均<0.05)。顆粒酶表達與肺泡炎積分、血清IFN-γ、Ⅱ-2濃度變化呈正相關性，其相關系數(r)分別為0.