脾胃濕熱證濕熱偏重量化的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的與意義：脾胃濕熱證其濕與熱的偏重和量化是診斷與治療的關(guān)鍵。本課題運(yùn)用實(shí)驗(yàn)動物造模，通過施加多種因素：①濕熱環(huán)境、②肥甘飲食(高糖高脂飼料)、③藥物(白酒、附子干姜煎劑)、④致病微生物(大腸桿菌)的綜合作用和中醫(yī)經(jīng)典、經(jīng)驗(yàn)方(白虎加蒼術(shù)湯、清香散)的治療反證等手段來研究脾胃濕熱證中濕偏重及熱偏重的動物模型。并從動物的癥狀、體征、生化、免疫、病理等指標(biāo)的變化量化濕熱，以闡明脾胃濕熱證形成的機(jī)理和病理基礎(chǔ)，進(jìn)一步揭示濕熱證證的本質(zhì)，為濕熱

2、證所屬系列疾病的遣方用藥奠定基礎(chǔ)。 結(jié)論： 1.在濕熱環(huán)境、肥甘飲食、藥物、病原微生物多因素作用下，結(jié)合生化、免疫、病理、分子生物學(xué)等指標(biāo)，建立脾胃濕熱證濕偏重型、熱偏重型大鼠模型； 2.胃動素、胃泌素指標(biāo)量的變化能客觀地反映體內(nèi)消化功能的狀態(tài)。B組血漿胃動素增高，C組血漿胃動素降低；B、C組血漿胃泌素降低，B組＞C組，反映出脾胃濕熱證中消化功能的紊亂； 3.AQP2能調(diào)節(jié)機(jī)體水液代謝，實(shí)驗(yàn)表明：B組尿液

3、AQP2含量明顯減少，C組大鼠模型的尿液AQP2含量明顯增加。AQP2在腎臟的表達(dá)中，B組大鼠模型的腎臟AQP2表達(dá)明顯比A、E組及D組減少，而C組表達(dá)增多。，因此在脾胃濕熱證中可作為量化濕、熱偏重的重要指標(biāo)之一； 4.HSP70表達(dá)增強(qiáng)能反映炎癥感染的強(qiáng)弱。實(shí)驗(yàn)表明：造模組淋巴細(xì)胞HSP70表達(dá)明顯增加，且熱偏重組比濕偏重組增高明顯。說明HSP70表達(dá)增強(qiáng)可作為熱偏重指標(biāo)之一。 5.電鏡進(jìn)一步從形態(tài)學(xué)反映了造模組脾臟超

4、微結(jié)構(gòu)發(fā)生病理改變，其中濕偏重和熱偏重所表現(xiàn)的超微結(jié)構(gòu)改變不盡相同； 6.脾胃濕熱證模型胃粘膜細(xì)胞凋亡明顯增加，其凋亡調(diào)控的相關(guān)基因P53、Bcl-2表達(dá)均增強(qiáng)，推測可能P53表達(dá)強(qiáng)于Bcl-2表達(dá)。 7.實(shí)驗(yàn)分別給予清香散、白虎加蒼術(shù)湯作用于濕偏重證、熱偏重證大鼠模型。結(jié)果表明：(1)清香散、白虎加蒼術(shù)湯能有效改善脾胃濕熱證濕偏重證和熱偏重證動物模型的癥狀和體征；(2)清香散、白虎加蒼術(shù)湯有調(diào)節(jié)腎、尿液中AQP2的作用

5、；(3)清香散、白虎加蒼術(shù)湯能夠調(diào)節(jié)機(jī)體HSP70的表達(dá)，保持細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整，維持細(xì)胞正常功能的作用(4)清香散、白虎加蒼術(shù)湯能有效調(diào)節(jié)機(jī)體血漿胃動素、胃泌素水平。(5)清香散、白虎加蒼術(shù)湯可能有提高機(jī)體免疫功能和修復(fù)作用；(6)清香散、白虎加蒼術(shù)湯能調(diào)節(jié)胃粘膜細(xì)胞凋亡，具有保護(hù)和修復(fù)胃粘膜的作用。 研究結(jié)果表明：在濕熱環(huán)境、肥甘飲食、藥物、病原微生物等多因素共同作用下，建立的脾胃濕熱證模型中，分別施加白酒與附子干姜煎劑后，造成了

6、濕偏重脾胃濕熱證大鼠模型與熱偏重脾胃濕熱證大鼠模型，通過觀察臨床癥狀與體征，上述兩模型均符合臨床；運(yùn)用經(jīng)典、經(jīng)驗(yàn)方(清香散、白虎加蒼術(shù)湯)通過系列指標(biāo)的檢測亦反證了上述兩個模型的客觀性。脾胃濕熱證中脾濕與胃熱以脾胃為中心的理論，經(jīng)典論述很多，但缺乏客觀化指標(biāo)，為此在實(shí)驗(yàn)中從多層面進(jìn)行探討：從脾臟超微結(jié)構(gòu)的病理變化；生化指標(biāo)血漿胃動素、胃泌素的變化及系列免疫組化如胃粘膜AI、P53、Bcl-2的表達(dá)等一致性反映出脾胃濕熱證證的本質(zhì)在于脾胃

7、消化功能的失調(diào)與紊亂，印證了脾胃為中心的理論。脾濕重的量化與體內(nèi)出現(xiàn)水液代謝失常，與AQP2相關(guān)(濕偏重時尿液中AQP2含量明顯減少，熱偏重時尿液AQP2含量增加)，因此可作為量化濕的指標(biāo)之一；胃熱重的量化與HSP70表達(dá)(造模組HSP70表達(dá)明顯增加，且熱偏重組比濕偏重組增高明顯)反映熱的偏重相關(guān)。綜上所述，在濕熱環(huán)境、肥甘飲食、藥物、病原微生物的復(fù)合作用下，建立脾胃濕熱證濕偏重證、熱偏重證的動物模型。運(yùn)用中醫(yī)經(jīng)典理論，結(jié)合現(xiàn)代實(shí)驗(yàn)手