大鼠腎炎濕熱證血尿模型的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的： 通過建立不同造模方法的血尿模型，比較其相關(guān)指標(biāo)，希望找到更符合中醫(yī)濕熱證，“病證結(jié)合”且價格低廉的腎炎血尿動物模型。 方法： 選擇50只SPF級雄性Wistar大鼠為實(shí)驗(yàn)動物，在口服并定時尾靜脈注射牛血清白蛋白(BSA)的基礎(chǔ)上給予不同的干預(yù)，建立具有系膜增生性改變的濕熱證大鼠血尿模型。隨機(jī)分為5組：①正常組；②模一組，注射葡萄球菌腸毒素B(SEB)，不加環(huán)境和飲食因素的對照模型組；③模二組，注射SEB，

2、施加環(huán)境和飲食濕熱因素的改良模型組；④模三組，不注射SEB，施加環(huán)境和飲食濕熱因素組；⑦模四組，不注射SEB，施加兩次環(huán)境和飲食濕熱因素組。觀察動物至十二周末，處死動物。利用生物學(xué)方法、放射免疫法、光學(xué)顯微鏡等手段觀察各組大鼠一般情況和體溫、體重變化，尿紅細(xì)胞，24小時尿蛋白定量，腎組織病理變化，同時檢測各組大鼠的腎功能，血脂四項(xiàng)以及血清中IL-6的含量。 結(jié)果： 1.一般情況 各模型組大鼠均出現(xiàn)程度不等的發(fā)熱、

3、嗜臥、行動呆滯、聳毛、飲水少、食欲不振、肛門紅腫充血、大便爛、尿少色深，舌質(zhì)暗紅，有的舌苔稍白膩，模二和模四組部分出現(xiàn)眼眵、腹瀉、皮下水腫等表現(xiàn)，且皮下水腫、尿少色深等情況一直持續(xù)到實(shí)驗(yàn)結(jié)束。模三、四組體重較其他組顯著增加，至實(shí)驗(yàn)結(jié)束。增加濕熱因素的模型組體溫凈增值均較對照模型組(模一組)高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。 2.尿紅細(xì)胞及尿蛋白測定 2.1尿紅細(xì)胞：第5周末至12周末，各模型組大鼠尿紅細(xì)胞數(shù)明顯增多，

4、并持續(xù)至實(shí)驗(yàn)結(jié)束，與正常組比較有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)；12周末，模二組尿紅細(xì)胞數(shù)最多，與其他模型組差異有統(tǒng)計學(xué)意義；模三、模四組紅細(xì)胞數(shù)少于模一組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01，P<0.05)；模四組尿紅細(xì)胞數(shù)較模三組多，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。 2.2尿蛋白：12周末，各模型組尿蛋白較正常組明顯增高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)；模二組尿蛋白最多，但較模一組差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；模三組、模四組

5、較模一組少，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)；模四組尿蛋白量較模三組多，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。 3.腎功能測定 3.1血尿素氮水平(BUN)：各模型組BUN水平較正常組均有所增高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05，P<0.01)；模一組BUN水平最高，但與模二、模三，模四組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；模四組BUN水平較模三組高，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。 3.2血肌酐水平(Scr)

6、：各模型組Scr水平較正常組明顯增高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)；模二組Scr水平最高，與模一組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)，模三、模四組Scr水平較模一組高，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；模四組Scr水平較模三組高，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。 4.血脂水平測定 4.1血清總膽固醇(CHOL)：各模型組CHOL水平較正常組明顯增高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)；模二組CHOL水平最高，與模

7、一組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，模三CHOL水平較模一組低、模四組CHOL水平較模一組高，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；模四組的CHOL水平較模三組高，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。 4.2血清甘油三酯(TG)：各模型組TG水平較正常組明顯增高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05，P<0.01)；模二組TG水平最高，與模一組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，模三組TG水平較模一組低，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0

8、.05)，模四組TG水平較模一組高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；模四組TG水平較模三組高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。 4.3血清高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、血清低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)：各組實(shí)驗(yàn)大鼠血清HDL-C和LDL-C平之間均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。 5.血清白細(xì)胞介素6(IL-6)水平測定：各模型血清IL-6水平較正常組明顯增高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)；模二組血清IL-

9、6水平最高，與模一組比較差異有有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；模三、模四組血清IL-6水平低于模一組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)；模四組血清IL-6水平高于模三組，但無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。 6.病理組織學(xué)觀察 光鏡組織學(xué)變化：光鏡下，正常組大鼠腎小球系膜細(xì)胞及基質(zhì)無增生，毛細(xì)血管襻開放，腎小管結(jié)構(gòu)規(guī)則，間質(zhì)無增生及炎細(xì)胞浸潤。各模型組大鼠可見彌漫性腎小球系膜區(qū)增寬，系膜細(xì)胞、系膜基質(zhì)增生，毛細(xì)血管腔狹窄，部分

10、腎小球萎縮，個別腎小球呈分葉狀，腎小囊輕度擴(kuò)張，腎小管間質(zhì)有炎細(xì)胞浸潤。尤其是模二組病理改變最為顯著，模型一組與二組差異不明顯；模三、模四組病理改變與模一、二組相似，但沒有上述兩組顯著，模三與模四組比較無明顯差異。 結(jié)論： 我們根據(jù)中醫(yī)有關(guān)濕熱證的病因病理學(xué)理論，利用綜合因素，成功制成了具有濕熱證改變的大鼠系膜增生性腎炎血尿模型。與傳統(tǒng)造摸方法比較，施加飲食、環(huán)境濕熱因素后，能升高大鼠的體溫，加重大鼠血尿、水腫及血清總膽