血管活性腸肽對(duì)臭氧應(yīng)激大鼠肺組織及支氣管上皮細(xì)胞粘蛋白分泌的影響.pdf

1、目的：氣道高反應(yīng)性疾病時(shí)氣道上皮細(xì)胞大量脫落，粘液分泌增多、同時(shí)伴有局部大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。氣道粘液是一種含脂質(zhì)、糖結(jié)合物和蛋白質(zhì)的膠體，高分子量的粘液糖蛋白(又稱為粘蛋白，mucins，MUC)是氣道粘液的最主要成份，具有較高的粘滯性且較難被清除。氣道高反應(yīng)性疾病氣道產(chǎn)生和分泌大量粘液，易引起氣道阻塞，是哮喘等氣道高反應(yīng)性疾病的重要臨床特征之一，因此，關(guān)于粘液在氣道高反應(yīng)性疾病的作用及作用機(jī)制探討成為近年來(lái)研究的熱點(diǎn)。近年來(lái)有大量研究表

2、明VIP是肺內(nèi)重要的神經(jīng)肽，具有擴(kuò)張肺血管和氣道平滑肌、減輕炎癥反應(yīng)、刺激腺體分泌等多種功能，肺和呼吸道受損傷刺激時(shí)，局部的VIP濃度增高，VIP受體表達(dá)也增多。本研究根據(jù)本實(shí)驗(yàn)室先前的研究基礎(chǔ)，從氣道失穩(wěn)態(tài)機(jī)制出發(fā)，用臭氧應(yīng)激大鼠，建立非變異性氣道高反應(yīng)模型，觀察臭氧應(yīng)激后SD大鼠肺組織和支氣管上皮細(xì)胞中三種粘蛋白(mucin，MUC)(MUC1、MUC2、MUC5AC)的表達(dá)改變，以及血管活性腸肽(VIP)對(duì)這三種粘蛋白的影響。

3、r>　　 方法：肺組織實(shí)驗(yàn)：40只SD大鼠隨機(jī)分成4組：正常對(duì)照組、臭氧應(yīng)激組、臭氧應(yīng)激+VIP滴鼻治療組和氧應(yīng)激+生理鹽水滴鼻治療組，每組10只。(1)運(yùn)用免疫組化標(biāo)記，分別檢測(cè)三種粘蛋白(MUC1、MUC2、MUC5AC)表達(dá)改變，以及VIP對(duì)這三種粘蛋白的影響，探討VIP對(duì)臭氧應(yīng)激后大鼠肺組織粘蛋白表達(dá)的影響。(2)運(yùn)用western-blot方法，分別檢測(cè)三種粘蛋白(MUC1、MUC2、MUC5AC)表達(dá)改變，以及VIP對(duì)這三

4、種粘蛋白的影響，探討VIP對(duì)臭氧應(yīng)激0后大鼠肺組織粘蛋白表達(dá)的影響。細(xì)胞水平實(shí)驗(yàn)：常規(guī)體外培養(yǎng)SD大鼠支氣管上皮細(xì)胞，實(shí)驗(yàn)分組：正常對(duì)照組、臭氧應(yīng)激組、臭氧應(yīng)激+VIP組和臭氧應(yīng)激+生理鹽水組，運(yùn)用western-blot檢測(cè)各組SD大鼠支氣管上皮細(xì)胞三種粘蛋白(MUC1、MUC2、MUC5AC)表達(dá)的改變，從細(xì)胞水平探討VIP對(duì)臭氧應(yīng)激后SD大鼠支氣管上皮細(xì)胞粘蛋白表達(dá)的影響。
　　 結(jié)果：生理?xiàng)l件下大鼠肺組織及支氣管上皮細(xì)胞