干擾素-ε聯(lián)合阿糖胞苷誘導(dǎo)K562細胞凋亡的研究.pdf

1、目的： 本實驗研究干擾素(IFN-ε)和小劑量阿糖胞苷(Ara-C)單獨和聯(lián)合應(yīng)用對CML急變細胞株K562細胞(Ph染色體陽性細胞)的誘導(dǎo)凋亡作用。 方法： K562細胞株在體外培養(yǎng)至對數(shù)生長期時，將實驗分為9組：未用藥組(對照組)、IFN-ε500U/ml組、IFN-ε1000U/ml組、IFN-ε2000U/ml組、Ara-C 0.02mmol/ml組、Am-C0.04mmol/ml組、Ara-C 0.08

2、mmol/ml組、Ara-C 0.02mmol/ml+IFN-ε500U/ml組、Ara-C0.08mmol/L+IFN-ε2000U/ml聯(lián)合組作用K562細胞72h后，用瑞氏-姬姆薩染色后高倍顯微鏡下觀察細胞形態(tài)的變化，流式細胞術(shù)觀察細胞凋亡水平。作用K562細胞24、48、72h后，RT-PCR檢測不同實驗組Survivin基因的表達情況。 結(jié)果： 干擾素(IFN-ε)和小劑量阿糖胞苷(Ara-C)單獨和聯(lián)合應(yīng)用K

3、562細胞72h后，可見K562細胞皺縮、體積變小，胞質(zhì)致密，細胞間連接減少，細胞碎片呈簇狀分布于細胞周圍。隨著藥物濃度的增高，凋亡細胞的數(shù)量也增多。Ara-C 0.08mmol/L+IFN-ε2000U/ml聯(lián)合組作用K562細胞72小時后，可見核固縮、核仁裂解和凋亡小體。IFN-ε2000U/ml組和Ara-C 0.08mmol/ml組細胞凋亡率分別為18.92％、19.42％，Ara-C 0.08mmol/L+IFN-ε2000U

4、/ml聯(lián)合組凋亡率為59.53％，較對照組和單獨實驗組細胞凋亡率明顯增加(P＜0.01)。單獨用藥組和聯(lián)合用藥組均能下調(diào)Survivin基因的表達水平，且隨著濃度的增加其表達水平亦降低(P＜0.05)。Ara-C 0.08mmol/L+IFN-ε2000U/ml聯(lián)合組Survivin基因表達水平較單獨用藥組和對照組均明顯降低(P＜0.01)。 結(jié)論： IFN-ε與Ara-C單獨及聯(lián)合應(yīng)用均可誘導(dǎo)K562細胞凋亡，且存在劑