三氧化二砷、STI571單獨(dú)及聯(lián)合應(yīng)用誘導(dǎo)K562細(xì)胞凋亡機(jī)制的研究.pdf

1、目的:研究三氧化二砷(ATO)、STI571單獨(dú)誘導(dǎo)CML細(xì)胞模型K562細(xì)胞凋亡的機(jī)制,并觀察ATO與不同濃度STI571組合對(duì)K562細(xì)胞是否具有協(xié)同作用.研究方法:通過細(xì)胞增殖與活力檢測(cè)、半固體培養(yǎng)法觀察ATO和STI571單獨(dú)及聯(lián)合對(duì)K562細(xì)胞生長的影響;細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察、流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)ATO和STI571單用和聯(lián)合作用后的凋亡細(xì)胞群體和細(xì)胞周期;酶聯(lián)免疫吸附(Elisa)法分別檢測(cè)ATO、STI571單獨(dú)及聯(lián)合作用后K562細(xì)

2、胞胞漿細(xì)胞色素C(Cyt C)、半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)活性,并觀察加入Caspase-3特異性抑制劑后的活性阻斷效應(yīng);采用半定量逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)分別檢測(cè)ATO和STI571單獨(dú)和聯(lián)合作用后對(duì)K562細(xì)胞的凋亡相關(guān)基因Bcl-X<,L>和CML致病基因bcr/abl轉(zhuǎn)錄本表達(dá)的影響.結(jié)論:(1)在國內(nèi)首次開展ATO和 STI571聯(lián)合對(duì)CML分子靶向治療機(jī)制的探索,發(fā)現(xiàn)二者均可抑制K562細(xì)胞增殖,作用