凡納濱對蝦抗WSSV家系選育及抗病特性和遺傳性狀研究.pdf

1、凡納濱對蝦(Litopenaeus vannamei(Bone，1931)又稱南美白對蝦、萬氏對蝦、白腿對蝦等，原產(chǎn)于南美洲太平洋赤道南北沿海，是目前世界養(yǎng)殖產(chǎn)量最高的3大蝦種之一。該蝦具有生長快、抗逆性強(qiáng)、對飼料蛋白的要求相對較低、肉味鮮美、加工出肉率高等優(yōu)點。我國于1988年引進(jìn)凡納濱對蝦，經(jīng)十幾年的探索，其養(yǎng)殖規(guī)模迅速擴(kuò)大，并已成為我國的主要對蝦養(yǎng)殖品種，目前該蝦養(yǎng)殖產(chǎn)量占我國蝦類總產(chǎn)量的80％以上。但由于凡納濱對蝦疾病的頻繁出現(xiàn)

2、，特別是白斑綜合癥病毒(White Spot Syndrom Virus，簡稱WSSV)影響凡納濱對蝦養(yǎng)殖的健康發(fā)展，并造成了重大經(jīng)濟(jì)損失，成為限制凡納濱對蝦養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的瓶頸。由于WSSV感染途徑廣闊，且一經(jīng)感染就很難控制，所以單純的藥物防治很難杜絕WSSV的暴發(fā)流行，選育抗WSSV的對蝦是預(yù)防WSSV流行的有效措施。
　　 本研究在一代凡納濱對蝦抗WSSV個體選育和二代家系選育的基礎(chǔ)上，在2004～2007年三年間完成第三、四

3、代抗WSSV家系選育，共構(gòu)建113個抗WSSV家系；通過對歷代選育家系進(jìn)行人工定量病毒感染，根據(jù)每個家系對蝦的死亡時間、尾數(shù)和成活情況建立抗病評價體系，K=(∑Ai×Mi+1×F)/N，從而將選育家系劃分為強(qiáng)抗性家系、中等抗性家系和敏感家系。為對蝦抗病良種選育提供依據(jù)。
　　 通過不同的感染方式(投喂、注射)，不同生長階段(稚蝦、中蝦、成蝦)以及不同感染水平(102 copies.g-1、103 copies.g-1、104co

4、pies.g-1、105copies.g-1)的應(yīng)答研究，分析強(qiáng)抗性家系、中等抗性家系和敏感家系對蝦的抗病機(jī)制，并提出以103copies/g為合適的感染實驗建模濃度。通過對各免疫相關(guān)因子(AKP、ACP、SOD、POD、PO、血藍(lán)蛋白含量等)的研究，進(jìn)一步分析抗WSSV凡納濱選育對蝦抗WSSV的性能和選育效果。
　　 采用實時熒光定量PCR檢測，結(jié)果表明：強(qiáng)抗性對蝦、中等抗性對蝦、敏感對蝦和未選育蝦在活體肌肉中WSSV的平均含

5、量分別為7.033×106.copies.g-1，1.619×107copies.g-1，2.372×107copies.g-1，2.065×107copies.g-1，而強(qiáng)抗性對蝦僅為7.033×106 copies.g-1，只有敏系對蝦的29.65％。因此，與敏感對蝦和未選育對蝦相比較，強(qiáng)抗性對蝦肌肉中的病毒量只有敏感對蝦和未選育對蝦29.65％和34.06％。即在相同的感染條件下，有65～70％病毒被強(qiáng)抗性對蝦的抗病機(jī)制所抵御，而

6、感染實驗結(jié)果：抗病家系對蝦成活率顯著高于其他抗性家系，也證實了這一情況。
　　 另外，在瀕死的強(qiáng)抗性對蝦、中等抗性對蝦、敏感對蝦和未選育對蝦肌肉中的WSSV的平均含量分別為3.61×108 copies.g-1，2.83×108 copies.g-1，2.35×108copies.g-1，2.799×108 copies.g-1。在瀕死對蝦中，強(qiáng)抗性對蝦比敏感對蝦和未選育對蝦高53.62％和28.93％，相比較而言強(qiáng)抗性對蝦的抗

7、的WSSV能力比敏感對蝦和未選育對蝦高53.62％和28.93％，因此WSSV的發(fā)病時間推遲2～3d。
　　 通過對歷代選育對蝦的經(jīng)濟(jì)性狀的測定和抗病特性的研究，分析各凡納濱對蝦選育家系的表型特性及與抗WSSV的相關(guān)，建立抗病力(Y)與體長/頭胸甲高(X)的回歸曲線：Y=0.898 x2-11.494 x+37.001(R2=0.7082)。根據(jù)親子資料估算抗病遺傳力為0.198，第三代“中興一號”抗病遺傳力為0.265?？共≡u

8、價結(jié)果表明第三代選育家系抗病性能比第二代提高39.56％。
　　 初步建立雜交模式，抗病性狀的雜交優(yōu)勢(H)為10.19％，結(jié)果表明，正、反交F1代在遺傳上均偏向于母本。以選育的抗病對蝦為母本與其他對蝦雜交，可其明顯提高后代的抗病性能。為篩選生長快、抗病性強(qiáng)的對蝦新品種，縮短新品種的培育周期提高可靠的依據(jù)。也為今后凡納濱對蝦的抗病良種的進(jìn)一步選育提供科學(xué)依據(jù)。
　　 常規(guī)生長實驗和熒光標(biāo)記生長實驗，研究選育對蝦抗WSSV

9、性能和生長的關(guān)系，總結(jié)抗病(y)與對蝦生長(x)的關(guān)系：y=-180175x2+4439x-26.777(r2=0.4026)，為今后抗病品種的選育打下理論基礎(chǔ)。
　　 總之，經(jīng)連續(xù)的定向選育的抗病家系對蝦具有明顯的抗WSSV性能，且其死亡的高峰比敏感家系對蝦和未選育蝦推遲2～3d，延緩了對蝦WSSV綜合癥大量發(fā)病的時間，可為對蝦養(yǎng)殖采取相應(yīng)預(yù)防和治療措施提供了寶貴的時機(jī)。通過連續(xù)5年(包括前期工作)大規(guī)模家系選育，以頭胸甲寬＞