凡納濱對蝦抗WSSV性狀遺傳參數(shù)評估及與中國明對蝦抗WSSV性狀差異研究.pdf

1、本實驗以凡納濱對蝦（Litopenaeus vannamei）和中國明對蝦（Fenneropenaeus chinensis）為實驗對象，采用單尾、定量的方法進行白斑綜合征病毒（white spot syndrome virus,WSSV）口飼感染，對凡納濱對蝦新品種“壬海1號”體重性狀和抗WSSV存活時間遺傳力以及兩者的遺傳相關進行評估，并從WSSV侵染后相同溫度和不同溫度條件下感染W(wǎng)SSV后存活時間、存活率以及感染后不同時間對蝦體內

2、病毒載量等多個角度，進一步比較凡納濱對蝦和中國明對蝦對WSSV的敏感性差異；以期闡明不同對蝦種類對WSSV抗病性的差異及影響因素，為抗病良種選育工作提供理論基礎與參考。具體研究內容如下：
　　1.凡納濱對蝦體重和抗WSSV性狀遺傳參數(shù)評估
　　為評估4月齡凡納濱對蝦“壬海1號”體重性狀和抗WSSV性狀的遺傳參數(shù)，對101個家系的3000尾凡納濱對蝦進行為期15 d的抗WSSV性能測試。利用動物模型估計其體重和抗WSSV性狀遺

3、傳力以及兩者的遺傳相關。結果表明，凡納濱對蝦“壬海1號”體重的遺傳力估計值為0.104±0.276，感染W(wǎng)SSV后存活時間的遺傳力估計值為0.145±0.073，均屬于低等遺傳力水平，經(jīng)統(tǒng)計檢驗差異顯著（P＜0.05）。體重與感染 WSSV后存活時間遺傳相關與表型相關系數(shù)分別為0.69和0.47，屬于中度正相關，Z-score檢驗結果達到極顯著水平（P＜0.01）。結果表明，本群體中遺傳變異較小，可以考慮通過多構建家系，提高選擇強度等方

4、法進行改良。并且需要采用經(jīng)濟加權或者百分比加權的形式，制定多性狀綜合選擇方案，以培育出綜合性狀的優(yōu)良品種。
　　2.中國明對蝦和凡納濱對蝦對白斑綜合征病毒(WSSV)敏感性比較
　　本實驗分別對中國明對蝦野生群體（Wild- F.chinensis,W-Fc）、中國明對蝦選育群體“黃海2號”（ Selected- F.chinensis,S-Fc）和凡納濱對蝦商業(yè)一代苗種（Commercial-L.vannamei,C-Lv

5、）三組對蝦采用單尾定量飼喂感染W(wǎng)SSV的方法進行感染實驗，比較W-Fc、S-Fc及C-Lv對WSSV的敏感性差異。結果表明，感染同等含量WSSV后，W-Fc、S-Fc和C-Lv的平均存活時間分別為124.11±39.49 h、166.15±51.54 h和136.90±41.99 h，顯示出三組對蝦間的平均存活時間存在顯著性差異（P＜0.05）。三組對蝦在感染期間的死亡趨勢為：W-Fc在第96 h達到死亡高峰，并且一直持續(xù)到216 h；

6、S-Fc和C-Lv在144 h出現(xiàn)死亡高峰。另外，分別在感染后的第3 h、6 h、12 h、24 h、36 h、48 h、72 h、144 h共8個時間點對三組對蝦進行活體取樣，利用實時熒光定量RT-PCR（Real Time-Polymerase Chain Reaction）技術對其進行了病毒載量檢測，從對蝦存活時間和體內肌肉組織病毒載量的角度探尋不同對蝦抗病性能的差異，結果如下：第48 h時，W-Fc、S-Fc和C-Lv三組對蝦體

7、內肌肉組織的病毒載量分別為1.22×106±6.14×105 copies/ng DNA、7.10×103±7.26×102 copies/ng DNA和1.50×104±4.19×103 copies/ng DNA；第144 h時，三組對蝦體內肌肉組織病毒載量分別為8.44×106±1.25×106 copies/ng DNA、3.21×106±8.21×105 copies/ng DNA和1.49×106±6.59×105 copi

8、es/ng DNA。實驗結果顯示三組對蝦對WSSV敏感性從高到低依次為中國明對蝦野生群體、凡納濱對蝦商業(yè)苗種、中國明對蝦選育群體，表明中國明對蝦選育群體“黃海2號”在人工感染W(wǎng)SSV條件下表現(xiàn)出了良好的抗病性能。
　　3.不同溫度下凡納濱對蝦和中國明對蝦對白斑綜合征病毒(WSSV)耐受性比較
　　分別對凡納濱對蝦“壬海1號”（L.vannamei“Renhai No.1”）和中國明對蝦“黃海2號”（F.chinensis“H

9、uanghai No.2”）在三種溫度條件下（24℃、28℃和32℃），采用單尾定量飼喂感染白斑綜合征病毒的方法進行感染實驗，比較兩組對蝦在不同溫度情況下對WSSV的耐受性差異。結果表明，L-24℃和F-24℃組的平均存活時間分為184.05±69.56 h和101.68±38.45 h；L-28℃和F-28℃組的平均存活時間分別為100.25±26.79 h和73.38±22.22 h，相同溫度組內均存在顯著性差異（P＜0.05）；截

10、至第15 d，L-32℃和F-32℃組的存活率分別為45.74％和23.47%。三個溫度組對蝦在50%死亡率時的存活時間分別為178 h和98 h、98 h和74 h、292 h和78 h；死亡高峰時間分別為第5d和第4d、第5d和第4d、第10d和第4d。另外，分別在感染后的第12 h、24 h、48 h、72 h、96 h、120 h、144 h、168 h、15 d共9個時間點對每組對蝦進行活體取樣，利用實時熒光定量技術對其進行了

11、病毒載量檢測，從對蝦體內肌肉組織病毒載量的角度探尋不同對蝦抗病性能的差異。第144 h時，L-24℃和 F-24℃組對蝦肌肉內病毒載量分別達到2.97×106±7.44×106和8.08×106±3.22×106 copies/ng DNA，差異極顯著（P＜0.01），L-28℃和F-28℃組分別達到6.73×106±1.49×106和1.20×107±6.15×105 copies/ng DNA，表現(xiàn)出極顯著差異（P＜0.01）；第1