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1、白斑綜合癥病毒(White spot syndrome virus,WSSV)是一種宿主廣泛,傳染性強(qiáng),對(duì)蝦高致死性病毒,嚴(yán)重制約世界對(duì)蝦養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展。WSSV在對(duì)蝦體內(nèi)增殖不僅與蝦體的免疫水平,病毒自身有關(guān),還與環(huán)境因子密切相關(guān)。環(huán)境因子不僅影響對(duì)蝦的免疫水平,還能影響WSSV的致病力。研究環(huán)境因子對(duì)WSSV致病力及在宿主體內(nèi)增殖的影響成為解決 WSSV問題的重要手段。本文通過鹽度、氨氮、亞硝酸氮漸變和突變對(duì)WSSV感染凡納濱對(duì)蝦及WS
2、SV在對(duì)蝦體內(nèi)增殖的影響,并探討不同溫度條件下3種弧菌分別對(duì)白斑綜合癥病毒在對(duì)蝦體內(nèi)增殖的影響。結(jié)果如下:
1、鹽度由起始鹽度(23±1)往高鹽度(32±1)和低鹽度(14±1)突變?cè)谡麄€(gè)實(shí)驗(yàn)中對(duì)凡納濱對(duì)蝦的累積死亡率和對(duì)蝦體內(nèi)病毒增殖的影響顯著(P<0.05),鹽度漸變實(shí)驗(yàn)各組至24h對(duì)蝦死亡率低于18.9%,48h出現(xiàn)死亡高峰,72h~96h存在顯著差異(P<0.05)。因此鹽度變化會(huì)影響對(duì)蝦的抗病能力,可造成對(duì)蝦體內(nèi)WS
3、SV快速增殖;對(duì)攜帶WSSV對(duì)蝦,鹽度變化會(huì)大大提高WSSV從潛伏感染轉(zhuǎn)為急性感染的可能,鹽度是引起WSSV從潛伏感染轉(zhuǎn)為急性感染的關(guān)鍵影響因子之一。
2、氨氮濃度從起始濃度0.05 mg/L往中濃度1.25 mg/L和高濃度3.0 mg/L突變?cè)谡麄€(gè)實(shí)驗(yàn)中對(duì)凡納濱對(duì)蝦的累積死亡率和對(duì)蝦體內(nèi)病毒增殖影響顯著(P<0.05),氨氮濃度漸變實(shí)驗(yàn)各組至24h累積死亡率低于13.3%(P>0.05),48h后開始出現(xiàn)差異(P<0.05
4、)。因此氨氮濃度變化越大對(duì)對(duì)蝦體內(nèi)病毒增殖影響越顯著,WSSV從潛伏感染轉(zhuǎn)為急性感染的可能越大,所以控制水質(zhì)中氨氮含量在低濃度水平對(duì)預(yù)防WSS爆發(fā)至關(guān)重要。
3、整個(gè)亞硝酸氮濃度變化實(shí)驗(yàn),先感染W(wǎng)SSV實(shí)驗(yàn)中,亞硝酸氮由起始濃度0.05 mg/L往中濃度10 mg/L和高濃度20 mg/L漸變和突變過程中對(duì)凡納濱對(duì)蝦累積死亡率及病毒增殖影響顯著(P<0.05)。后感染W(wǎng)SSV實(shí)驗(yàn)中,亞硝酸氮由起始濃度0.05 mg/L往中濃度
5、10 mg/L和高濃度20 mg/L漸變、突變至24h對(duì)蝦死亡率低于12.2%,48h后突變組首先出現(xiàn)死亡高峰,72h~120h存在顯著差異(P<0.05),因此攜帶WSSV的對(duì)蝦對(duì)亞硝酸氮濃度變化更敏感,引起WSSV從潛伏感染轉(zhuǎn)為急性感染。亞硝酸氮突變結(jié)果和漸變相比,亞硝酸氮突變更容易提高對(duì)蝦對(duì)WSSV的易感性。
4、不同溫度下副溶血弧菌和WSSV的致病性:溫度為19±1℃條件下,至實(shí)驗(yàn)結(jié)束各組累積死亡率和病毒攜帶量分別低于
6、11.1%,1.2×103 copies/g。溫度25±1℃條件下,48h~96h單獨(dú)感染W(wǎng)SSV組死亡率(最大值63.3%)與合并感染組(62.2%)無明顯差異,但12 h~72 h所有合并感染組病毒攜帶量(最大值2.5×102 copies/g)明顯低于單獨(dú)感染W(wǎng)SSV組(1.9×105 copies/g)。96h合并感染組病毒增殖迅速(5.7×104 copies/g)。細(xì)菌單獨(dú)感染組死亡率隨濃度升高而升高(21.1%)。溫度為3
7、1±1℃條件下,單獨(dú)感染W(wǎng)SSV組死亡率和病毒攜帶量(47.8%,2.2×104 copies/g)明顯低于合并感染組(77.8%,3.9×105 copies/g)。合并感染組和單獨(dú)感染細(xì)菌組(33.3%)致死率隨細(xì)菌濃度升高而升高。說明合并感染(副溶血弧菌和WSSV)和單獨(dú)感染副溶血弧菌對(duì)對(duì)蝦的致病力隨溫度升高而升高,而且合并感染在不同溫度下對(duì)WSSV增殖影響顯著。
5、不同溫度下鰻弧菌和WSSV的致病性:溫度為19±1℃
8、條件下,至實(shí)驗(yàn)結(jié)束各組累積死亡率和病毒攜帶量分別低于11.1%,1.2×103 copies/g。當(dāng)溫度為25±1℃時(shí),48 h~96 h單獨(dú)感染 WSSV累積死亡率與合并感染組差異顯著(P<0.05),而且合并感染組不同濃度之間存顯著差異(P<0.05),死亡率最大值為77.8%(合并感染濃度2.3×106 cfu/ml組)。當(dāng)溫度為31±1℃時(shí),各組累積死亡率在48 h開始升高,合并感染組死亡率和病毒增殖明顯快于單獨(dú)感染W(wǎng)SSV組。
9、隨著感染時(shí)間延長(zhǎng),單獨(dú)感染鰻弧菌組隨濃度升高,對(duì)蝦死亡加快。因此低溫條件下,鰻弧菌和WSSV致病力不高,隨著溫度升高,合并感染的致病力隨溫度升高而升高,即溫度能顯著影響鰻弧菌和WSSV的致病力。
6、不同溫度下哈維氏弧菌和WSSV的致病性:溫度為19±1℃條件下,整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程死亡率都低于8.9%,各組病毒攜帶量低于3.9×104 copies/g。溫度25±1℃條件下,病毒單獨(dú)感染組(71.1%,1.9×105 copies/
10、g)和高濃度繼發(fā)感染組(77.8%,3.2×106 copies/g)死亡率及病毒攜帶量從實(shí)驗(yàn)中期開始明顯高于其他組(P<0.05),死亡加快,病毒攜帶量迅速增加。單獨(dú)感染哈維氏弧菌組隨感染濃度升高為增加,最大值為(21.1%)。溫度31±1℃條件下,單獨(dú)感染W(wǎng)SSV組(47.8%,2.2×104 copies/g)從實(shí)驗(yàn)中期開始明顯低于繼發(fā)感染組(80.0%,6.1×106 copies/g);單獨(dú)感染哈維氏弧菌組隨濃度升高而升高(2
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