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文檔簡介
1、目的:長鏈非編碼RNA(lncRNA)是近些年的研究熱點(diǎn),它雖然不編碼任何蛋白質(zhì),但可以通過表觀遺傳學(xué)機(jī)制實(shí)現(xiàn)對基因表達(dá)的調(diào)控。本課題檢測?;撬嵘险{(diào)基因1(taurineupregulatedgene1,TUG1)和生長停滯敏感基因5(Growtharrest-specific5,GAS5)兩種lncRNA在結(jié)直腸癌和癌旁正常組織中的表達(dá)。平滑肌22α(smoothmuscle22alpha,SM22α)蛋白是一種重要的細(xì)胞骨架相關(guān)蛋白
2、,在多種惡性腫瘤中表達(dá)下調(diào)。本課題通過檢測SM22α在結(jié)直腸癌和癌旁正常組織中的mRNA及蛋白水平表達(dá),探討其意義。
方法:選取31例結(jié)直腸癌患者的腫瘤組織及癌旁正常組織(取自距腫瘤組織10cm之外的腸管黏膜)。應(yīng)用實(shí)時(shí)定量RT-PCR方法檢測組織中TUG1,GAS5及SM22α基因的相對轉(zhuǎn)錄活性。用免疫組化法檢測SM22α蛋白在組織中的相對表達(dá)水平。
結(jié)果:
1.TUG1和GAS5在癌組織中表
3、達(dá)活性升高
實(shí)時(shí)定量PCR結(jié)果顯示,83.87%的患者(26/31)癌組織中的TUG1表達(dá)水平高于癌旁正常組織;80.65%的患者(25/31)癌組織中的GAS5表達(dá)水平高于癌旁正常組織。經(jīng)配對t檢驗(yàn)分析,TUG1及GAS5在癌組織中表達(dá)活性明顯高于癌旁正常組織(P<0.05)。
2.TUG1和GAS5在癌組織中的表達(dá)水平與腫瘤病理特征的相關(guān)性根據(jù)實(shí)時(shí)定量PCR結(jié)果與患者腫瘤病理特征進(jìn)行相關(guān)性分析,采用獨(dú)立樣
4、本t檢驗(yàn)分析方法對數(shù)據(jù)進(jìn)行處理。結(jié)果顯示,TUG1和GAS5兩種lncRNA表達(dá)水平與腫瘤分化程度(低分化與中分化)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、浸潤深度(未侵及漿膜與侵及漿膜)及發(fā)生部位(結(jié)腸與直腸)等病理特征均無顯著性相關(guān)關(guān)系(P>0.05)。
3.SM22α在癌與癌旁正常組織中的表達(dá)差異.實(shí)時(shí)定量PCR結(jié)果顯示,51.61%的患者(16/31)癌組織中的SM22αmRNA表達(dá)水平低于癌旁正常組織,但無統(tǒng)計(jì)學(xué)上的顯著性差異(P>0.0
5、5)。免疫組化染色結(jié)果顯示,90.32%的患者(28/31)癌組織中SM22α蛋白表達(dá)水平低于癌旁正常組織;經(jīng)配對t檢驗(yàn)分析,癌組織中的SM22α水平明顯低于癌旁正常組織,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);應(yīng)用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)分析顯示,SM22α蛋白表達(dá)與腫瘤分化程度(低分化與高分化)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、浸潤深度(未侵及漿膜與侵及漿膜)及發(fā)生部位(結(jié)腸與直腸)均無統(tǒng)計(jì)學(xué)相關(guān)性(P>0.05)。結(jié)果提示,在大腸癌組織中,SM22α的降解可能加快,
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