白英抗癌活性部位的篩選及抗肺癌A549機(jī)制的研究.pdf

1、目的：實(shí)驗(yàn)研究白英抗癌活性部位的篩選及對(duì)體內(nèi)外癌細(xì)胞的增殖抑制、誘導(dǎo)凋亡及其可能作用機(jī)制，為開發(fā)和臨床使用該中藥治療癌癥提供實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。 方法：白英全草干品提取藥物活性部位C2,C3,D3,D5,D8；體外培養(yǎng)人肺癌A549、鼠H22肝癌細(xì)胞，采用MTT法篩選出兩個(gè)最有效的活性部位作為加藥組的藥物；觀察加藥組人肺癌A549細(xì)胞形態(tài)變化；檢測細(xì)胞凋亡率；電泳測定DNA梯狀條帶，半定量RT-PCR.(reverse transcrip

2、tion-polymerase chain raction)檢測bid、easpase-9mRNA表達(dá)的變化；建立Balb/c小鼠皮下H22肝癌細(xì)胞移植瘤模型，進(jìn)行白英藥物活性部位對(duì)Balb/c小鼠移植瘤作用的初步探討，分5組瘤內(nèi)給予白英C2,C3注射7天的治療，計(jì)算瘤體生長抑制率，腫瘤組織病理切片檢查，用抗CD34多克隆抗體顯示血管內(nèi)皮細(xì)胞，對(duì)MVD(icrovessel density)用免疫組化進(jìn)行人工計(jì)數(shù)和定量分析。 結(jié)

3、果：白英活性部位對(duì)癌細(xì)胞增殖有較強(qiáng)的抑制作用，抑制效果依次是C3>C2>D8>D5>D3；藥物組可見細(xì)胞核固縮、染色質(zhì)凝集、邊聚等特征，細(xì)胞凋亡率顯著增高，電泳可見明顯的DNA梯狀條帶,bid、caspase-9 mRNA表達(dá)上調(diào)，16只Balb/C小鼠可見皮下移植瘤出現(xiàn)，藥物組小鼠瘤體生長緩慢，病理出現(xiàn)凝固性或液化性壞死改變，MVD人工計(jì)數(shù)均低于空白對(duì)照組。 結(jié)論：白英活性部位C3,C2,D3,D5,D8對(duì)人肺癌A549細(xì)胞增