大鼠大腦中動脈閉塞認(rèn)知功能改變及干預(yù)的實驗研究.pdf

1、背景和目的： 缺血性腦血管病是一種嚴(yán)重危害人類健康及生存的疾病，缺血性腦血管病導(dǎo)致的偏癱及認(rèn)知功能障礙成為影響人類生存質(zhì)量的最大障礙。臨床上大腦中動脈閉塞導(dǎo)致的腦梗死占缺血性腦血管病的絕大部分。既往人們往往重視大腦中動脈閉塞(middlecerebralarteryocclusion，MCAo)導(dǎo)致的神經(jīng)功能(如：偏癱等)障礙，而對MCAO后血管性認(rèn)知障礙關(guān)注較少(vascularcognitiveimpairment，VCI)

2、。血管性認(rèn)知障礙患者逐年增多，嚴(yán)重影響患者生活質(zhì)量。目前VCI以藥物治療為主，主要包括乙酰膽堿酯酶(AChE)抑制劑。但是這類藥物具有毒副作用大，昂貴的弊端，很難在臨床上普遍使用。所以尋找一種有效的治療血管性認(rèn)知障礙的藥物尤為重要。近年來5-羥色胺等單胺類神經(jīng)遞質(zhì)與記憶的密切關(guān)系已經(jīng)逐漸受到人們的重視。研究證明臨床應(yīng)用5-羥色胺再攝取抑制劑(SSRIs)藥物能夠有效改善認(rèn)知功能障礙，西酞普蘭是SSRIs類藥物中的一種，可是西酞普蘭在改善

3、卒中后認(rèn)知障礙方面的效果還不甚清楚。本實驗選擇Longa等法改良復(fù)制MCAo模型動物，觀察認(rèn)知功能的變化，同時給予鹽酸多奈哌齊(Donepezil)、西酞普蘭(Cipramil)兩種藥物進(jìn)行干預(yù)，觀察兩種藥物對MCAo動物認(rèn)知功能變化的影響，探討大腦中動脈閉塞與認(rèn)知功能障礙的關(guān)系，對比研究兩種不同藥理作用的藥物對大腦中動脈閉塞導(dǎo)致的認(rèn)知功能障礙的作用，旨在為為臨床VCI的干預(yù)提供依據(jù)。 方法： 采用ZeaLonga等法改

4、良復(fù)制MCAo模型動物，126只SD大鼠隨機分為7組，每組18只：假手術(shù)組(A組)、缺血30min對照組(Ba組)、缺血30min鹽酸多奈哌齊干預(yù)組(Ca組)、缺血30min西酞普蘭干預(yù)組(Da組)、缺血90min對照組(Bb組)、缺血90min鹽酸多奈哌齊干預(yù)組(Cb組)、缺血90min西酞普蘭干預(yù)組(Db組)，以1.65mg/kg.d鹽酸多奈哌齊、6.25mg/kg.d西酞普蘭灌胃給藥，持續(xù)14天。假手術(shù)組、對照組大鼠以每只2ml/

5、d生理鹽水灌胃，歷時相同時間。 治療2周后，將腦制成的腦片，進(jìn)行TTC染色觀察其梗塞情況。應(yīng)用經(jīng)典的Morris水迷宮實驗、檢測事件相關(guān)電位中的P300潛伏期的變化，觀察治療后大鼠認(rèn)知功能的變化。檢測大鼠海馬單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的改變，觀察認(rèn)知功能障礙后大鼠海馬單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的變化，評判兩種藥物干預(yù)措施對海馬單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的影響。免疫組化染色觀察大鼠海馬膽堿能神經(jīng)元的損害以及干預(yù)后的變化。 結(jié)果： 1、大鼠P300潛伏

6、期的變化：假手術(shù)組大鼠P300潛伏期為250.00±12.71ms，缺血90min、30min對照組大鼠P300潛伏期比假手術(shù)組明顯延長(P＜0.01)。缺血30min兩藥物干預(yù)組與其對照組大鼠P300潛伏期相比沒有明顯差異(P＞0.05)，缺血30min兩藥物干預(yù)組之間比較亦無明顯差異(P＞0.05)。缺血90min兩藥物干預(yù)組大鼠P300潛伏期與其對照組大鼠相比均顯著縮短(P＜0.01)，且鹽酸多奈哌齊組大鼠P300潛伏期比西酞普蘭

7、組大鼠明顯縮短(P＜0.01)。缺血90min對照組、西酞普蘭組及鹽酸多奈哌齊組與其相應(yīng)的缺血30min組P300潛伏期相比明顯延長(P＜0.01，P＜0.05)。 2、大鼠水迷宮實驗的平均逃避潛伏期的變化：缺血90min、30min對照組大鼠平均逃避潛伏期與假手術(shù)組比較明顯延長(P＜0.01，P＜0.05)。缺血30min兩藥物干預(yù)組逃避潛伏期與其對照組無明顯差異(P＞0.05)。缺血90min兩藥物干預(yù)組與其對照組比較明顯縮

8、短(P＜0.01)。實驗3、4、5天缺血90min鹽酸多奈哌齊組平均逃避潛伏期與西酞普蘭組比較明顯縮短(P＜0.05)。缺血90min對照組、鹽酸多奈哌齊組、西酞普蘭組平均逃避潛伏期與其相對應(yīng)缺血30min組相比均顯著延長(P＜0.01)。 3、大鼠平臺象限游泳時間及占總游泳時間百分比(tP/tT)的變化：缺血90min、30min對照組大鼠tP/tT百分比明顯小于假手術(shù)組(P＜0.01，P＜0.05)。缺血30min兩藥物干預(yù)

9、組tP/tT百分比與其對照組無明顯差異(P＞0.05)。缺血90min兩藥物干預(yù)組的百分比值與其對照組相比顯著增加(P＜0.05)，且鹽酸多奈哌齊組tP/fT顯著大于西酞普蘭組(P＜0.05)。缺血90min對照組、鹽酸多奈哌齊組、西酞普蘭組的tP/tT比值均顯著小于其相應(yīng)缺血30min組(P＜0.05，P＜0.01)。 4、大鼠平臺象限游泳距離及占總游泳距離百分比(dP/dT)的變化：缺血90min、30min對照組大鼠dP/

10、dT百分比明顯小于假手術(shù)組(P＜0.01，P＜0.05)。缺血30min兩藥物干預(yù)組dP/dT百分比與其對照組無明顯差異(P＞0.05)。缺血90min兩藥物干預(yù)組的百分比值與其對照組相比顯著增加(P＜0.05)，且鹽酸多奈哌齊組dP/dT顯著大于西酞普蘭組(P＜0.05)。缺血90min對照組、鹽酸多奈哌齊組、西酞普蘭組的dP/dT比值均顯著小于其相應(yīng)缺血30min組(P＜0.05，P＜0.01)。 5、大鼠海馬單胺類神經(jīng)遞質(zhì)

11、的變化：缺血90min、30min對照組大鼠海馬的NE、DA和5-HT的含量與假手術(shù)組相比明顯降低(P＜0.05)。缺血30min兩藥物干預(yù)組大鼠海馬的NE、DA和5-HT'的含量也呈降低趨勢但與其對照組比較則無明顯差異(P＞0.05)，且兩藥物干預(yù)組之間亦無明顯差異(P＞0.05)。缺血90min兩藥物干預(yù)組大鼠海馬NE、5-HT和DA的含量比其對照組明顯升高(P＜0.01，P＜0.05)，且鹽酸多奈哌齊組大鼠海馬NE、DA和5-HT

12、的含量較西酞普蘭組明顯升高(P＜0.05，P＜0.01)。缺血90min對照組、鹽酸多奈哌齊組和西酞普蘭組大鼠海馬NE、DA和5-HT的含量明顯比其相應(yīng)缺血30min組降低(P＜0.05，P＜0.01)。 6、大鼠ChAT免疫組織化學(xué)染色的變化：免疫組化染色觀察發(fā)現(xiàn)假手術(shù)組大鼠海馬膽堿能神經(jīng)元密集排列，形態(tài)規(guī)則。對照組大鼠海馬膽堿能神經(jīng)元排列稀疏、紊亂，并且膽堿能神經(jīng)元出現(xiàn)固縮深染，細(xì)胞結(jié)構(gòu)不清等改變，缺血30min對照組大鼠的

13、病變程度較輕，缺血90min對照組大鼠的病理程度重。缺血90min兩藥物干預(yù)組大鼠海馬膽堿能神經(jīng)元與對缺血90min照組大鼠比較明顯增多，且鹽酸多奈哌齊組與西酞普蘭組大鼠海馬膽堿能神經(jīng)元比較亦明顯增多。 結(jié)論： 1、大腦中動脈閉塞可以造成認(rèn)知功能下降，并且隨著缺血時間的延長，認(rèn)知功能損害越重。 2、兩種藥物干預(yù)均可不同程度的改善認(rèn)知功能障礙。針對不同缺血時間的大腦中動脈閉塞所致的認(rèn)知功能障礙，兩種藥物干預(yù)結(jié)果各有