大豆抗病毒基因GmNH23的篩選鑒定及功能分析.pdf

1、大豆花葉病毒(Soybean Mosaic Virus，SMV)是一種在全球傳播范圍較廣的病毒。目前大豆的一些SMV抗性相關的遺傳連鎖標記(QTL)在染色體上已經(jīng)定位，但是具體的抗性基因(resistance gene，R)仍未被發(fā)現(xiàn)。在煙草中已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了抗TMV的N蛋白，N蛋白屬于NBS-LRR家族蛋白。我們在大豆基因組上發(fā)現(xiàn)了35個N基因的同源基因，將其命名為GmNH（Glycine max N-Homolog）基因。當抗病基因過表達

2、時，會與病原相互作用產(chǎn)生植物細胞程序性死亡的超敏反應(Hypersensitive Response，HR)。本次實驗中利用這種超敏反應對23個GmNH基因的SMV抗性進行了篩選鑒定。同時因為GmNH基因是N基因的同源基因，所以檢測了GmNH基因?qū)MV的抗性。結(jié)果表明，在大豆N-homolog基因中只有GmNH23對SMV和TMV均具有抗性，而其余的N-homolog基因?qū)@兩種病毒都沒有抗性。另外，我們發(fā)現(xiàn)GmNH23為大豆miR-

3、2和miR-9的靶標基因，然后我們通過RLM-RACE和Dual-luciferase assay驗證了miR2/9對GmNH23的調(diào)控作用。SMV成功侵染時miR2/9的水平上調(diào)，而其靶標GmNH23的表達量下調(diào)。綜上所述，GmNH23為一個編碼NBS-LRR蛋白的抗病毒基因，其表達受miR2/9的調(diào)控。SMV通過誘導miR2/9來抑制GmNH23的表達，最終達到成功侵染和擴增。我們的結(jié)果揭示了miR2/9-GmNH23的調(diào)控關系及其