野生橘與枳橙和早花檸檬體細胞雜交創(chuàng)造新型砧木.pdf

1、野生種往往具有常規(guī)栽培種少有的優(yōu)良特性，它們在增加遺傳多樣性、品種改良等方面都有重要的價值。然而，柑橘的多胚性、童期長、雌/雄性器官敗育等特性給野生種的有效利用增加了難度。體細胞雜交技術能有效克服這些問題，實現(xiàn)遠緣雜交，使親本的核或胞質DNA發(fā)生重組，轉移近緣野生種的有利性狀，為柑橘的遺傳改良提供了有效的途徑。本研究旨在利用體細胞雜交技術，將柑橘的野生品種與枳橙(PoncitrustrifoliataRaf×Citrussinensis

2、Osb.)、早花檸檬(C。limon)進行原生質體對稱融合，實現(xiàn)野生種有利性狀的轉移，創(chuàng)造新型砧木。主要結果如下： 1.調控野生橘愈傷組織的生長狀態(tài)，建立了利于原生質體分離的胚性愈傷組織懸浮系。經愈傷組織、葉肉原生質體的分離、純化、融合及培養(yǎng)再生，獲得了兩個組合，即崇義野橘(C.reticulata)+枳橙、崇義野橘+早花檸檬的再生胚狀體和植株。其中，崇義野橘+枳橙再生胚狀體的時間較長，但很快誘導生芽，崇義野橘+早花檸檬的胚狀體

3、生長迅速，但難以誘導生芽。說明在相同培養(yǎng)條件下，不同組合間融合產物的再生存在較大差異。 2.組合崇義野橘+枳橙再生的4棵最大的芽均為二倍體，SSR分析表明其核DNA除了具有葉肉親本與愈傷親本共有的特征帶外，還出現(xiàn)了兩條兩親本都沒有的新帶。隨機挑選崇義野橘+早花檸檬再生產物中的四個胚狀體，經流式細胞儀測定，其中兩個是四倍體，兩個是二倍體，SSR分析證實兩個四倍體同時具有雙親的核DNA特征帶，是異源四倍體，且其中一個出現(xiàn)了新帶，可能