短童期資源山金柑與早實枳、早花檸檬體細胞雜交及再生植株的分子鑒定.pdf

1、柑橘在我國園藝經(jīng)濟中具有重要地位。優(yōu)質(zhì)豐產(chǎn)是柑橘在國際市場上的核心競爭力。較長的童期是柑橘育種的主要障礙之一，而創(chuàng)制短童期的新種質(zhì)一直是柑橘育種的重要目標。細胞融合能實現(xiàn)遠緣雜交，而通過將短童期資源的原生質(zhì)體與其他栽培種進行原生質(zhì)體融合，有望縮短育種年限?；谶@一思路，本研究以短童期的山金柑為愈傷親本、早實枳和早花檸檬為葉肉親本進行細胞融合，旨在獲得短童期的新種質(zhì)，為柑橘育種和基礎(chǔ)研究提供材料。主要結(jié)果如下:
　　1.山金柑（愈傷

2、親本）+早花檸檬（葉肉親本）融合組合:最終移栽成活18株再生植株，來自13個不同的融合事件。經(jīng)流式細胞儀檢測倍性，結(jié)果顯示，其中12株再生植株（來自不同融合事件）為二倍體，1株為六倍體。采用SSR分子標記，對再生植株進行遺傳來源鑒定，結(jié)果顯示:該組合獲得的12棵二倍體再生植株（來自不同融合事件）的核基因組和葉綠體基因組均來自葉肉親本早花檸檬，同時可能發(fā)生了基因重組，出現(xiàn)非親本條帶;線粒體基因組均來自愈傷親本山金柑，由此得出結(jié)論:這12棵

3、二倍體再生植株植株均為胞質(zhì)雜種，而六倍體再生植株的遺傳來源有待進一步鑒定。
　　2.山金柑（愈傷親本）+早實枳（葉肉親本）融合組合:采用經(jīng)過改良的酶液酶解分離早實枳原生質(zhì)體，原生質(zhì)體融合及植株再生的方法仍采用本實驗室常用方法。該組合進行多次融合實驗，最終都僅得到再生愈傷。經(jīng)流式細胞儀進行倍性檢測，結(jié)果顯示:獲得的再生愈傷為二倍體與四倍體的混合愈傷。山金柑與早實枳細胞融合未能成功再生胚狀體和植株可能是因為兩融合親本親緣關(guān)系太遠，融合