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文檔簡介
1、目的:觀察神經(jīng)富亮氨酸重復(fù)家族成員LRRN3在小鼠胚胎中晚期發(fā)育過程中的表達變化,探討其在發(fā)育過程中的作用。
方法:獲得E9.5、E10.5、E12.5、E14.5、E16.5的BALB/c小鼠胚胎,分別提取胎鼠腦組織RNA和蛋白質(zhì),采用RT-PCR、Western Blot等方法對不同胎齡小鼠胎腦內(nèi)的LRRN3表達水平進行檢測。同時,制作同樣時間點的小鼠胚胎矢狀切片及成年小鼠部分器官組織切片,進行免疫組織化學染色,重點觀察L
2、RRN3在腦組織外的其他組織中的表達情況。
結(jié)果:RT-PCR檢測結(jié)果顯示,從E9.5腦組織中提取的樣本中基本無LRRN3的表達,E10.5、E12.5、E14.5、E16.5的小鼠胎腦中均檢測到LRRN3的表達,且LRRN3的表達在E12.5時最強,和其他組相比差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。Western blot結(jié)果顯示,從E9.5胎腦中提取到的蛋白質(zhì)樣本中,LRRN3表達極弱,與其他組相比差異具有統(tǒng)計學意義(P<0
3、.05)。隨后LRRN3表達逐漸增強,E12.5時該蛋白表達最強,E14.5、E16.5時表達強度減弱,與E12.5時表達強度相比,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。在對不同時期胚胎矢狀切片的免疫組織化學染色中發(fā)現(xiàn),除在腦表達外,LRRN3還廣泛階段性的表達在鼻板、腸腔、肝臟、胰腺、背根神經(jīng)節(jié)等部位;而在成年小鼠中LRRN3在器官中的表達位置更具特異性。
結(jié)論:LRRN3在小鼠胚胎中晚期發(fā)育過程中呈現(xiàn)時序性表達,參與腦、腸腔
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