花椰菜種子遺傳純度檢測與品種鑒定的分子標(biāo)記分析.pdf

1、花椰菜(Brasica oleracea var. botrytis L.)是世界上重要的蔬菜作物之一，由于其營養(yǎng)價值高，適應(yīng)性廣，種植面積大，在我國蔬菜產(chǎn)業(yè)占有重要的地位。花椰菜是異花授粉作物，具有顯著的雜種優(yōu)勢，目前市場上廣泛利用的均為雜交一代的種子。雜種優(yōu)勢的充分表現(xiàn)與種子遺傳純度有著密切的聯(lián)系，如果種子純度太低就會給生產(chǎn)帶來很大的影響。因而，建立準(zhǔn)確、高效，快速地鑒定花椰菜品種與檢測種子遺傳純度的方法是目前蔬菜生產(chǎn)中的一個重要課

2、題。 本研究利用三種分子標(biāo)記體系RAPD、ISSR和SSR對上海及周邊地區(qū)廣泛種植的銀冠花椰菜種子遺傳純度進(jìn)行檢測。以銀冠花椰菜F1及父母本為材料，篩選多態(tài)性引物，結(jié)果發(fā)現(xiàn)兩個RAPD引物(NAURP23和NAURP56)，兩個ISSR引物(NAUISR43和NAUISR75)及兩對SSR引物(NAUSSR2和NAUSSR14)能夠同時在F1代中產(chǎn)生父母本特異條帶，這些特異條帶可以用來進(jìn)行檢測雜交種種子遺傳純度。檢測結(jié)果表明，2

3、10個單株中發(fā)現(xiàn)了3株為假雜種，分別為4號、178號、184號單株。六個引物擴(kuò)增的結(jié)果都顯示這三個單株擴(kuò)增的圖譜與其母本的擴(kuò)增圖譜很相似，都未產(chǎn)生父本特異標(biāo)記，推測其為母本自交產(chǎn)生的假雜種。這一結(jié)果與田間形態(tài)學(xué)鑒定結(jié)果高度一致。因而，銀冠花椰菜種子遺傳純度為98.57％。本研究表明，RAPD、ISSR、SSR這三種標(biāo)記體系都能夠有效地鑒定花椰菜種子遺傳純度，而且綜合利用三種標(biāo)記的檢測結(jié)果比單一使用其中一種標(biāo)記檢測的結(jié)果更加準(zhǔn)確可靠。

4、 同時，本研究利用RAPD、ISSR、SRAP三種分子標(biāo)記技術(shù)對全國廣泛種植的30個花椰菜品種及1個青花菜、1個甘藍(lán)品種進(jìn)行了指紋圖譜的分子標(biāo)記分析，分別構(gòu)建了三種分子標(biāo)記數(shù)字化核酸指紋圖譜。分析結(jié)果顯示：32個品種間存在著較高的多態(tài)性，綜合這兩個引物的分析結(jié)果可以完全區(qū)分開32個供試品種。利用三種分子標(biāo)記構(gòu)建的指紋圖譜進(jìn)行了聚類分析，結(jié)果均顯示甘藍(lán)、青花菜與花椰菜品種間的親緣關(guān)系較遠(yuǎn)。花椰菜不同品種間的親緣關(guān)系與其分布的地理位置及