甘藍主要品種鑒定與遺傳純度快速檢測.pdf

1、甘藍是常異花授粉作物，具有明顯的雜種優(yōu)勢。本研究利用多種分子標記對甘藍類蔬菜品種進行種質資源鑒定及遺傳多樣性分析，并對甘藍主栽品種進行遺傳純度鑒定，通過建立標準DNA指紋圖譜，進行新品種登記和品種鑒定、品種的真實性和純度檢驗，對于良種質量檢測、種子質量標準化、保護名優(yōu)特種質及育成品種的知識產(chǎn)權和育種家的權益、種質的親緣關系和分類與進化研究等，都將產(chǎn)生積極的推動作用。 本研究用RAPD、ISSR、SRAP、SSR等分子標記技術對甘

2、藍商品雜交種‘早夏16’進行了遺傳純度檢測。以早夏16父母本及F<,1>為材料，基因組對157個RAPD隨機擴增引物、72個ISSR引物、84對SRAP引物組合和44對SSR引物組合進行了分析，產(chǎn)生了父母本特異性標記約8個，3個RAPD引物NAURP2006，NAURP2020與NAURP2031，2個ISSR引物NAUISRl 058與NAUISR1062，1個SRAP引物組合NAUSR04/NAURS05，2個SSR引物組合NAUS

3、SR1011和NAUSSR1031。這8個引物均能在F<,1>雜種中擴增出父母本特異標記。利用這8個能同時產(chǎn)生父母本特異標記的引物對純度鑒定圃中的210個F<,1>單株進行了檢測，結果顯示，NAURP2006共檢測到10個假雜種，NAURP2020、NAURP2031和NAUSSR1011檢測到12個假雜種，NAUISR1058、NAUISR1062、NAUSR04/NAURS05和NAUSSR1031分析共檢測到11個假雜種，其中有9

4、個單株在這8個引物中表現(xiàn)一致，表現(xiàn)為僅產(chǎn)生了母本特異條帶，推測是由于制種過程中母本自交產(chǎn)生的假雜種。標記分析結果與田問純度鑒定結果高度一致，表明RAPD、ISSR、SRAP和SSR技術是鑒定甘藍商品雜交種子純度的穩(wěn)定高效的方法。 利用RAPD、ISSR和SSR三種分子標記對甘藍雜交種新夏50進行了遺傳純度的鑒定。利用83個RAPD引物、49個ISSR引物及56對SSR引物對新夏50父母本及F<,1>DNA進行了分析。引物篩選結果

5、顯示，2個RAPD引物(NAURP2068 and NAURP2079)，2個ISSR引物(NAUISR1034 and NAUISRl062)和1個SSR引物(NAUSSR1011)在F<,1>雜種中同時產(chǎn)生了父本特異條帶和母本特異條帶，可以成功用于雜種遺傳純度的檢測。利用這5個引物對雜種新夏50進行了基因型的檢測。在所檢測的228個F<,1>雜種單株中，有16個單株表現(xiàn)為假雜種，其中8個單株的電泳圖譜與5個引物檢測的母本帶型一致，可

6、能是由于母本自交所產(chǎn)生的假雜種。結果表明，RAPD、ISSR和SSR分子標記是雜交種種子質量控制過程的有效工具。 本研究利用RAPD、ISSR、SRAP三種分子標記技術對上海地區(qū)及其周邊城市33個甘藍主栽品種及1個青花菜、1個花椰菜品種進行了分析。從150個RAPD引物、64個ISSR引物及84對SRAP中挑選了多態(tài)性引物RAPD17個，ISSR20個，SRAP15對對35個甘藍類品種基因組DNA進行擴增。RAPD擴增結果顯示共

7、產(chǎn)生了170條擴增帶，平均每個引物擴增出10條，其中多態(tài)性條帶124條，多態(tài)率為72.9％；ISSR擴增結果顯示共產(chǎn)生159條清晰帶，其中多態(tài)性條帶123條，平均每個引物擴增出7.95條，多態(tài)率為77.4％；sRAP擴增結果顯示共產(chǎn)生了157條擴增帶，其中多態(tài)性條帶為118條，平均每個引物擴增出10.47條，多態(tài)率為75.16％；說明35個甘藍類品種內(nèi)存在較高的多態(tài)性。其中引物me7-1/em11-1的多態(tài)性最高，有14條多態(tài)性條帶，多

8、態(tài)性條帶的百分率為93.33％，該引物可以區(qū)分30個供試品種。利用其中兩個引物NAURP1068和me7-1/em11-1在35個品種間擴增出的多態(tài)性標記可將全部品種鑒別。三種標記聚類圖譜均顯示青花菜、花椰菜與甘藍品種遺傳關系較遠。研究結果表明RAPD、ISSR、SRAP三種分子標記技術均能有效地應用于甘藍類蔬菜作物的品種鑒定，且利用多種分子標記綜合分析甘藍類品種之間的遺傳關系更加準確、可靠。 根據(jù)本文的研究結果，表明分子標記(