黃芪總苷對小鼠日本血吸蟲病肝纖維化病變、TGF-β1及其受體表達(dá)的影響.pdf

1、背景和目的：日本血吸蟲病肝纖維化是導(dǎo)致門靜脈高壓、腹水和上消化道出血的主要原因，也是日本血吸蟲病患者死亡的主要原因。針對血吸蟲病的發(fā)生發(fā)展過程，治療主要針對以下三個關(guān)鍵環(huán)節(jié)：殺蟲、抑制蟲卵肉芽腫以及延緩甚至阻止肝纖維化。殺蟲藥有效殺蟲后，肝組織內(nèi)的蟲卵結(jié)節(jié)及纖維化仍能繼續(xù)發(fā)展。目前尚無理想的抗血吸蟲病肝纖維化藥物。中藥黃芪的有效部位群黃芪總苷(astrogalosides，AST)是一種新的有效的抗肝纖維化藥物，研究表明AST具有顯著的

2、抗炎、抗損傷、抗肝纖維化和免疫調(diào)節(jié)作用，而且毒副作用小。迄今未見AST體內(nèi)尤其是給予有效的殺蟲藥后對血吸蟲病肝纖維化影響的報(bào)道。研究表明血吸蟲病肝纖維化的發(fā)生與肝星狀細(xì)胞(hepatic stellate cells，HSCs)的激活及門管區(qū)成纖維細(xì)胞(portal fibroblast，PF)的參與有關(guān)，轉(zhuǎn)化生長因子 1(transforming growthfactor-betal，TGF- 1)是已知最強(qiáng)的肝星狀細(xì)胞激活和促纖維化

3、因子。本課題旨在研究AST對小鼠血吸蟲病肝纖維化及TGF- 1及其受體表達(dá)的影響。 方法：以日本血吸蟲尾蚴感染120只ICR.小鼠制作肝纖維化動物模型，5wk隨機(jī)分為：AST高劑量組(20mg-kg-1.d-1)、AST低劑量組(10mg-kg-1.d-1)、陽性藥組(護(hù)肝片540 mg-kg-1.d-1)和模型對照組，各組均于感染40天后，吡喹酮?dú)⑾x2天(500mg.kg-1d-1)。同時設(shè)置正常對照組30只。感染后6、10

4、和14 wk，每組隨機(jī)處死10只，觀察肝臟指數(shù)；應(yīng)用HE和天狼猩紅染色觀察小鼠蟲卵結(jié)節(jié)大小及纖維化程度；構(gòu)建組織芯片，采用免疫組織化學(xué)(immunohistochemistry，IHC)PV二步法和SP法檢測肝組織蟲卵結(jié)節(jié)中 -SMA、I、III型膠原、TGF- 1及其I、II型受體表達(dá)，利用Image.pro plus5.0.2進(jìn)行定量分析，采用平均光密度(mean opticaldensity，MOD)值表示組織中的上述蛋白相對含量

5、。 結(jié)果：(1)感染后6wk模型組小鼠肝組織可見急性血吸蟲蟲卵結(jié)節(jié)形成，10wk形成以成纖維細(xì)胞及單核細(xì)胞為主的慢性蟲卵結(jié)節(jié)，結(jié)節(jié)面積明顯增大，結(jié)節(jié)周圍見大量膠原纖維沉積，14wk見結(jié)節(jié)及門管區(qū)大量膠原纖維沉積并互相聯(lián)通，形成血吸蟲病的干線型纖維化。(2)感染后10 wk及14 wk，AST高、低劑量組與模型組相比較，肝組織血吸蟲蟲卵結(jié)節(jié)顯著縮小，纖維化程度明顯減輕，I、III型膠原蛋白含量明顯減低。感染后10wk，AST高劑

6、量組間III型膠原蛋白含量較AST‘低劑量組顯著減少(P<0.01)。(3)感染后10wk，.AS'I"'高、低劑量組與模型組相比較，肝組織蟲卵結(jié)節(jié)周圍的a.SMA陽性表達(dá)明顯降低(P<0.05)。(4)感染后10、14wk時，2個劑量組'FGF.p1蛋白表達(dá)均較模型組明顯降低，各實(shí)驗(yàn)組(模型組及AsT高、低劑量租)之間TBR I、II蛋白表達(dá)無差異。(5)感染后6wk，各實(shí)驗(yàn)組之間各參數(shù)均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 結(jié)論：(1)成功利用