裸腳菇屬菌產(chǎn)抗柑橘青、綠霉菌的活性物質(zhì)的發(fā)酵工藝研究.pdf

1、江西是柑橘類水果的主要產(chǎn)區(qū)之一，青、綠霉菌是導(dǎo)致柑橘采后腐爛的主要病害，化學(xué)殺菌劑已產(chǎn)生環(huán)境殘留和病原抗藥性，生物源殺菌物的研究日益受到重視。本實(shí)驗(yàn)室前期研究發(fā)現(xiàn)一株野生裸腳菇屬（Gymnopus sp.）菌株具有強(qiáng)烈抑制柑橘青、綠霉病害的活性，但缺乏該野生菌株?duì)I養(yǎng)生長(zhǎng)需求和代謝產(chǎn)抑菌活性物質(zhì)的基本資料，制約著對(duì)這一野生菌株資源的開發(fā)利用。
　　本文采用菌絲生長(zhǎng)速率法和顯微觀察法測(cè)定了其抑菌活性，單因素試驗(yàn)、Plackett-Bu

2、rman試驗(yàn)設(shè)計(jì)、最陡爬坡試驗(yàn)和Box-Behnken試驗(yàn)響應(yīng)面設(shè)計(jì)等優(yōu)化出液體培養(yǎng)基組成和培養(yǎng)條件，經(jīng)有機(jī)溶劑萃取、硅膠柱層析和HPLC半制備分離純化抑菌活性物質(zhì)。結(jié)果顯示：該祼腳菇屬菌發(fā)酵液對(duì)13種植物病原菌有抑制作用，抑制意大利青霉和指狀青霉的EC50值分別為69.25μg/mL和56.70μg/mL，對(duì)兩種菌菌絲的最小抑制濃度（MIC）和最小殺菌濃度（MFC）均分別為200μg/mL和250μg/mL，遠(yuǎn)小于陽性對(duì)照抑霉唑的MF

3、C500μg/mL，且對(duì)意大利青霉的菌絲造成了傷害作用。優(yōu)化液體搖瓶發(fā)酵工藝為：馬鈴薯280g/L，葡萄糖30g/L，麩皮8.25g/L，MgSO4·7H2O0.41g/L，KH2PO42g/L；維生素B1（VB1）3μg/mL，萘乙酸（NAA）和赤霉素（GA）分別為0.5μg/mL和2μg/mL；接種量為10%，裝液量100mL/250mL，溫度為28℃，初始pH為5.0，發(fā)酵周期為11d，優(yōu)化后發(fā)酵液抑菌活性從42.26%提高到55