三七總甙治療病毒性心肌炎的療效及分子基因機制的研究.pdf

1、背景和目的：病毒性心肌炎(VMC)的發(fā)病率有逐漸升高的趨勢，已經(jīng)成為內(nèi)科的常見病之一。但至今VMC的發(fā)病機制尚未完全闡明，診斷和治療尚無特異性方法，因此有必要對其進行深入研究。近年來，國內(nèi)外有關(guān)VMC治療的研究不少，但迄今為止，各種藥物的療效有限。本研究就是在建立VMC動物模型的基礎(chǔ)上探討三七總甙對VMC的治療作用及分子基因機制，以便闡明三七總甙對VMC的作用及其作用的理論基礎(chǔ)。 方法本實驗先用CVB<,3>感染BALB/c小鼠

2、建立VMC小鼠動物模型，然后用三七總甙和Vitc干預(yù)治療，觀察三七總甙和Vitc對VMC小鼠死亡率及心肌病變的影響。用ELISA方法觀察了VMC 小鼠血清TNF-α動態(tài)變化，用RT-PCR方法檢測TNF—αmRNA的表達，探討三七總甙對VMC TNF-α水平的影響。用TUNEL法及電子顯微鏡觀察VMC小鼠心肌細胞凋亡及三七總甙對VMC心肌細胞凋亡的影響。用免疫組化法檢測VMC小鼠心肌細胞iNOS和SOD蛋白表達及三七總甙對iNOS和SO

3、D蛋白表達的影響。 結(jié)果①三七總甙干預(yù)組和Vitc干預(yù)組VMC小鼠死亡率較未用藥的單純VMC組明顯減低，三七總甙干預(yù)組和Vitc干預(yù)組VMC小鼠炎細胞浸潤和心肌壞死明顯減輕。而三七總甙干預(yù)和Vitc干預(yù)組之間小鼠死亡率、炎細胞浸潤和心肌壞死沒有顯著差異。②VMC小鼠在接種病毒后3天-35天各時點的血清TNF-α水平明顯升高，VMC 小鼠在接種病毒后3天和7天心肌TNF-αmRNA水平也明顯高于對照組，三七總甙干預(yù)組血清TNF-α

4、水平明顯低于單純心肌炎組。③VMC小鼠各時點凋亡心肌細胞數(shù)較對照組明顯增加，VMC小鼠在接種病毒后7-9天電鏡檢查可見心肌細胞凋亡小體，內(nèi)含濃縮的胞質(zhì)成分，并可見核染色質(zhì)濃縮、集邊。電鏡結(jié)果也支持心肌細胞凋亡的存在，三七總甙治療組凋亡心肌細胞數(shù)明顯減少。 ④VMC小鼠各時點心肌細胞表達iNOS蛋白增加，三七總甙干預(yù)組小鼠iNOS蛋白的表達明顯減少。 ⑤VMC小鼠在接種病毒后9天和15天心肌細胞SOD蛋白表達減少，三七總甙干預(yù)組小鼠在

5、接種病毒后9天和15天SOD蛋白表達明顯增加。 結(jié)論：①三七總甙對VMC有治療作用。②小鼠VMC TMF-α及其mRNA水平明顯升高，三七總甙能降低TNF-α水平，三七總甙減低。TNF-α水平可能是其治療VMC的機制之一。③小鼠VMC中存在異常心肌細胞調(diào)亡現(xiàn)象。三七總甙能減少心肌細胞凋亡，這可能是其治療VMC的另一機制。④VMC中iNOS表達增加，三七總甙能減少iNOS表達，這可能也是其治療VMC的機制之一。⑤VMC中SOD表達