DHPLC檢測林州市高齡組和低齡組居民食管癌P53基因外顯子突變譜的比較研究.pdf

1、目的：用變性高效液相色譜(DHPLC)研究我國食管癌高發(fā)區(qū)林州市居民高齡食管癌患者與低齡食管癌患者中抑癌基因P53全部編碼外顯子基因突變譜的情況，比較分析兩組患者中P53基因突變的差異，了解P53在食管癌發(fā)生發(fā)展中的作用，探索食管癌發(fā)生發(fā)展的分子生物學變化。 方法：選取林州市居民70歲以上高年齡組食管癌患者30例和40歲以下低年齡組食管癌患者11例，常規(guī)提取DNA，PCR擴增P53第2-11外顯子全部編碼區(qū)和附近的一部分非編碼區(qū)

2、。擴增產(chǎn)物用DHPLC進行突變的篩查。篩查出的突變樣本進行DNA純化測序分析，測序結(jié)果在NCBI網(wǎng)站進行P53突變位點的比對和定位，了解林州市高齡食管癌患者與低齡食管癌患者P53第2-11外顯子突變譜的情況。 結(jié)果：檢測的41例患者中，發(fā)現(xiàn)P53至少有1個外顯子基因突變的病例數(shù)為28例，突變率為68.3％(28/41)。其中高年齡組30例病例中，發(fā)現(xiàn)有突變的為19例，突變率為63.3％(19/30)，低年齡組11例病例中，發(fā)現(xiàn)突

3、變的有9例，突變率為81.8％(9/11)，兩者比較沒有統(tǒng)計學意義(P=0.232＞0.05)。發(fā)現(xiàn)P53有2個外顯子基因突變的病例數(shù)為9例，突變率為22.0％(9/41)。其中高年齡組30例病例中，發(fā)現(xiàn)有2個外顯子基因突變的病例數(shù)為8例，突變率為26.7％(8/30)，低年齡組11例病例中，發(fā)現(xiàn)有2個外顯子基因突變的病例數(shù)為1例，突變率為9.1％(1/11)，兩者比較無統(tǒng)計學意義(P=0.436＞0.05)。在檢測的林州市居民P53基

4、因突變譜中，共有15種突變類型，共計59個突變位點，其中最多的突變類型是插入堿基C，共18例；其次為C→T轉(zhuǎn)換，共7例，G→C的顛換和堿基A的缺失則都為6例。編碼區(qū)的突變類型有6種，12例，主要以A和C的缺失，以及C和T的插入為主，各有2例，共計8例，占編碼區(qū)突變類型的66.7％(4/6)。在P53基因第2-8外顯子與內(nèi)含子交界的非編碼區(qū)也發(fā)現(xiàn)大量的基因突變位點。 結(jié)論：P53基因突變是林州市居民食管癌發(fā)生過程中的一個發(fā)生頻率很