RIP1在哮喘氣道上皮細(xì)胞壞死性凋亡中的作用.pdf

1、研究背景
　　氣道上皮細(xì)胞在啟動(dòng)和維持支氣管哮喘的氣道慢性炎癥中起著重要作用。支氣管哮喘患者氣道上皮細(xì)胞損傷甚至脫落，損傷的氣道上皮細(xì)胞通過分泌多種細(xì)胞因子和趨化因子，趨化并活化免疫細(xì)胞，啟動(dòng)支氣管哮喘的炎癥反應(yīng)；而且氣道屏障結(jié)構(gòu)破壞，也促進(jìn)過敏原與粘膜下層免疫細(xì)胞相互接觸，進(jìn)一步加重氣道的炎癥反應(yīng)。壞死性凋亡（necroptosis）是一種新發(fā)現(xiàn)的程序性壞死，以細(xì)胞器腫脹、細(xì)胞膜破裂為特征，RIP1、RIP3和MLKL是其重要的

2、信號(hào)分子。近期研究發(fā)現(xiàn)壞死性凋亡在調(diào)控機(jī)體急慢性炎癥反應(yīng)中起重要作用。但是，有關(guān)壞死性凋亡是否參與支氣管哮喘氣道上皮細(xì)胞脫落的研究目前國內(nèi)外尚未見報(bào)道。
　　目的：
　　探討RIP1在支氣管哮喘氣道上皮細(xì)胞壞死性凋亡中的作用。
　　方法：
　　本研究采用支氣管哮喘特征性細(xì)胞因子IL-13刺激人氣道上皮細(xì)胞系HBE體外模擬哮喘環(huán)境，采用流式細(xì)胞儀檢測氣道上皮細(xì)胞發(fā)生壞死性凋亡的情況，Western-Blot檢測壞死

3、性凋亡重要信號(hào)分子的表達(dá)變化。
　　結(jié)果：
　　1、IL-13誘導(dǎo)氣道上皮細(xì)胞發(fā)生壞死性凋亡
　　不同濃度IL-13（40 ng/ml,80 ng/ml,160 ng/ml）刺激HBE，結(jié)果顯示IL-13增加HBE PI/Annexin-v雙陽的比例(8.375％±0.6761%vs10.32%±0.5708%,11.62%±0.7117%,15.28%±1.060%,P<0.05，n=8)。RIP1抑制劑Nec-1減

4、少HBE PI/Annexin-v雙陽的比例(15.99%±2.857% vs8.401%±1.111%,P<0.05，n=8).
　　2、RIP1信號(hào)通路在哮喘氣道上皮細(xì)胞壞死性凋亡中的作用
　　不同濃度IL-13（40 ng/ml,80 ng/ml,160 ng/ml）刺激HBE，結(jié)果顯示IL-13上調(diào)RIPK1的表達(dá)(0.515±0.051 vs0.79±0.091,0.9775±0.1026,1.125±0.0849

5、，P<0.05，n=3)，RIPK3只在IL-13刺激濃度為160ng/ml時(shí)表達(dá)增加(1.057±0.138 vs1.65±0.0551,P<0.05，n=3)。RIP1抑制劑Nec-1抑制RIPK1(0.9633±0.06936 vs1.313±0.0441，P<0.05，n=3)和RIPK3(0.89±0.09539 vs1.563±0.1475,P<0.05，n=3)的表達(dá)。
　　結(jié)論：
　　我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明IL-