脂筏-神經酰胺在TNF-α激活人氣道上皮細胞DUOX1酶中的作用.pdf

1、華中科技大學碩士學位論文脂筏神經酰胺在TNFα激活人氣道上皮細胞DUOX1酶中的作用姓名：王麗芬申請學位級別：碩士專業(yè)：耳鼻咽喉頭頸外科指導教師：甄宏韜201004華中科技大學碩士學位論文華中科技大學碩士學位論文3DUOX1和P47phox的表達。2.利用激光共聚焦方法觀察細胞胞膜上的DUOX1和P47phox的表達，同時觀察兩者分別和脂筏標記蛋白霍亂毒素B亞單位（CholeratoxinBsubunitCTXB）和神經酰胺（Cerae

2、）的共定位現(xiàn)象。3.用活性氧檢測試劑盒檢測細胞內活性氧的生成。結果：結果：在脂筏提取物中，TNFα刺激細胞引起DUOX1和P47phox在細胞膜脂筏區(qū)中的表達增加（P0.05），脂筏干擾劑可以抑制TNFα刺激引起的DUOX1和P47phox在細胞膜脂筏區(qū)中表達增加（P0.05）；TNFα刺激細胞后，在共聚焦顯微鏡下可以觀察到DUOX1和P47phox在細胞膜上明顯發(fā)生簇聚現(xiàn)象，同時DUOX1和P47phox分別與脂筏的標記物霍亂毒素和神

3、經酰胺（Cerae）呈現(xiàn)共定位現(xiàn)象，脂筏干擾劑可以抑制TNFα刺激引起的DUOX1和P47phox在細胞膜上簇聚以及共定位現(xiàn)象；TNFα刺激氣道上皮細胞可以明顯增加細胞內的活性氧生成（P0.05），脂筏的干擾劑以及DUOX1的抑制劑可以抑制TNFα刺激引起的活性氧增加（P0.05）。結論：結論：TNFα可以引起氣道上皮細胞內DUOX1、P47phox在脂筏中的含量增加，即DUOX1、P47phox向脂筏區(qū)轉移，從而導致該酶的激活，刺激活