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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:探討人肝星形細(xì)胞(hepatic stellate cells,HSC)對(duì)肝癌細(xì)胞(HepG2、SMMC-7721)上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的作用及其機(jī)制。
方法:采用條件培養(yǎng)法培養(yǎng)肝癌細(xì)胞,利用細(xì)胞劃痕和Transwell實(shí)驗(yàn)分析肝星形細(xì)胞對(duì)肝癌細(xì)胞的遷移和侵襲作用。Western blot分析肝星形細(xì)胞自身及其分泌到培養(yǎng)液中趨化因子CXCL1[Chemokine(C-X-C motif) ligand1,CXCL1]和肝癌細(xì)胞的
2、CXCL1受體——CXCR2(C-X-C-chemokine receptor2,CXCR2)的表達(dá)量,以及條件培養(yǎng)下肝癌細(xì)胞中p-PI3K、p-AKT、p-GSK-3β和Snail的表達(dá)變化。激光共聚焦顯微術(shù)和Western blot檢測(cè)肝癌細(xì)胞上皮標(biāo)志物E-cadherin、間質(zhì)標(biāo)志物N-cadherin和Vimentin的表達(dá)變化。
結(jié)果:在HSC中大量表達(dá)并分泌趨化因子CXCL1,而肝癌細(xì)胞HepG2、SMMC-772
3、1中高表達(dá)CXCL1受體——CXCR2。肝癌細(xì)胞通過(guò)條件培養(yǎng)后,細(xì)胞形態(tài)改變,細(xì)胞間黏附下降,細(xì)胞遷移和侵襲能力增強(qiáng)與常規(guī)培養(yǎng)比較,P<0.05,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。上皮標(biāo)志物E-cadherin蛋白表達(dá)下調(diào)、間質(zhì)標(biāo)志物N-cadherin蛋白和Vimentin蛋白表達(dá)上調(diào),PI3K/AKT信號(hào)通路中的關(guān)鍵成員PI3K和AKT磷酸化水平上調(diào),p-GSK-3β和轉(zhuǎn)錄因子Snail表達(dá)上調(diào),與常規(guī)培養(yǎng)比較,P<0.05,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在肝
4、癌細(xì)胞條件培養(yǎng)下加入CXCR2受體的特異性抑制劑(SB265610)后,肝癌細(xì)胞上皮標(biāo)志物E-cadherin蛋白表達(dá)上調(diào)、間質(zhì)標(biāo)志物N-cadherin蛋白和Vimentin蛋白表達(dá)下調(diào),p-PI3K、p-AKT、p-GSK-3β和Snail的表達(dá)下調(diào),與添加前比較,P<0.05,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
結(jié)論:肝星形細(xì)胞促進(jìn)肝癌細(xì)胞的遷移和侵襲;肝星形細(xì)胞可能是通過(guò)CXCL-1/CXCR2軸激活PI3K/Akt/GSK-3β/S
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