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1、本研究利用分子標(biāo)記對(duì)周8425B及其57個(gè)衍生品種(系)和273份CIMMYT品種(系)的矮稈基因、抗病基因以及品質(zhì)基因進(jìn)行了檢測(cè),并分析了CIMMYT材料的高低分子量亞基與品質(zhì)的關(guān)系。主要結(jié)果如下: 1.58份周8425B及其衍生品種(系)中含矮稈基因Rht-D1b(86.2%)和Rht8(60.3%)的比例較高,含Rht-B1b(13.8%)比例較低;含雙矮稈基因型(Rht-B1b+Rht-D1b)的品系較少;在58份周84
2、25B及其衍生品種(系)中,4個(gè)顯性春化基因的組成比例不同??傮w趨勢(shì)是顯性春化基因Vrn-D1頻率最高(62.1%),Vrn-B1和Vrn-B4頻率次之(均為5.2%),Vrn-A1頻率為0;58份材料在這個(gè)位點(diǎn)均以隱性基因形式存在。Lr34/Yr18基因標(biāo)記csLV34是共顯性標(biāo)記,以該標(biāo)記檢測(cè)結(jié)果表明,這58份材料均不含抗條銹病基因Lr34/Yr18。 2.273份CIMMYT材料中含Rht-B1b(82.1%)的比例較高,
3、含Rht-D1b(14.3%)的比例較低,攜帶雙矮稈基因型(Rht-B1b+Rht-D1b)(4.7%)和高稈基因型(Rht-B1a+Rht-D1a)(8.4%)的品系較少。利用引物PPO18對(duì)273份CIMMYT材料Ppo-A1位點(diǎn)進(jìn)行檢測(cè),216份材料擴(kuò)增出685 bp片段,說明其含等位基因Ppo-A1a,占總數(shù)的79.1%;55份材料擴(kuò)增出876 bp片段,含等位基因Ppo-A1b,占總數(shù)的20.2%;兩個(gè)品種無(wú)擴(kuò)增片段,可能為新
4、的變異類型。在Ppo-D1位點(diǎn),利用PPO16和PPO29兩個(gè)標(biāo)記進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果表明PPO16在227份材料中擴(kuò)增出713 bp片段,說明其含有等位基因Ppo-D1a,占總數(shù)的83.2%;PPO29在46份材料中擴(kuò)增出490 bp片段,說明其含有等位基因Ppo-D1b,占總數(shù)的16.8%。 在Psy-A1位點(diǎn),利用分子標(biāo)記YP7A進(jìn)行檢測(cè),142個(gè)品種(系)擴(kuò)增出194 bp片段,說明其含有等位基因Psy-A1a,占總數(shù)的52%
5、;131個(gè)品種(系)擴(kuò)增出231 bp片段,說明其含有等位基因Psy-A1b,占總數(shù)的48%。利用標(biāo)記YP7B檢測(cè)Psy-B1位點(diǎn),155個(gè)品種擴(kuò)增出151 bp片段,說明其含有等位基因Psy-B1a,占總數(shù)的56.8%;43個(gè)品種擴(kuò)增出156 bp片段,說明其含有等位基因Psy-B1b,占總數(shù)的15.8%;75個(gè)品種無(wú)擴(kuò)增片段,說明其含有等位基因Psy-B1d,占總數(shù)的27.4%。利用另一對(duì)互補(bǔ)引物YP7B-3對(duì)等位基因Psy-B1d
6、進(jìn)行檢測(cè),發(fā)現(xiàn)75個(gè)品種擴(kuò)增出884 bp片段,其余無(wú)擴(kuò)增產(chǎn)物。 對(duì)于Waxy基因來(lái)說,利用分子標(biāo)記MAG264和MAG269檢測(cè)273個(gè)品種(系),結(jié)果表明在Wx-A1位點(diǎn)和Wx-D1位點(diǎn)均為野生型Wx-A1a和Wx-D1a。在Wx-B1位點(diǎn),204個(gè)品種(系)擴(kuò)增425bp片段,說明含有等位基因Wx-B1a,占總數(shù)的74.7%;69個(gè)品種(系)沒有擴(kuò)增出425 bp片段,說明含有等位基因Wx-B1b,占總數(shù)的25.3%。
7、 利用csLV34對(duì)273份CIMMYT小麥品種(系)的檢測(cè)結(jié)果表明,61個(gè)品種(系)擴(kuò)增出150 bp片段,含Lr34/Yr18基因,占總數(shù)的22.3%;212個(gè)品種(系)擴(kuò)增出229 bp片段,不含Lr34/Yr18基因,占總數(shù)的77.7%。 3.利用其它基因的分子標(biāo)記檢測(cè)142份CIMMYT小麥品種(系),在Glu-A1位點(diǎn),利用.Ax2*標(biāo)記在90個(gè)品種中增出1319 bp片段,說明其含有Ax2*。在GIu-B1位點(diǎn)
8、,引物ZSBy9aF1/R3在57個(gè)品種中擴(kuò)增出662 bp的片段,說明其均含有By9位點(diǎn):引物腳在46個(gè)品種中擴(kuò)增出675bp的片段,說明其含有Bx17基因;利用標(biāo)記MAR在5個(gè)品種中擴(kuò)增出800 bp片段,說明其含有Bx20基因。在Glu-D1位點(diǎn),118個(gè)品種在Dx5位點(diǎn)檢測(cè)得到450 bp的擴(kuò)增產(chǎn)物。利用SDS-PAGE檢測(cè)這5個(gè)位點(diǎn),其結(jié)果與STS標(biāo)記檢測(cè)結(jié)果完全吻合,說明這5個(gè)分子標(biāo)記均為有效性標(biāo)記,可以用于分子輔助育種。在
9、Glu-B1位點(diǎn)的By8基因,引物ZSBy8F5/R5共檢測(cè)出16個(gè)品種含有By8;利用SDS-PAGE檢測(cè)得出20個(gè)品種含有By8。這4個(gè)品種檢測(cè)結(jié)果的差異主要是分子標(biāo)記ZSBy8F5/R5可以區(qū)分By8和By8*基因,By8擴(kuò)增出527 bp帶型,而By8*無(wú)擴(kuò)增產(chǎn)物;而利用SDS-PAGE來(lái)檢測(cè)這一位點(diǎn),在SDS-PAGE上它們均為同一種帶型,不能區(qū)分占By8和By8*類型;利用RP-HPLC技術(shù)也檢測(cè)出這4份材料含有By8*亞基
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