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1、目的:檢測膽管上皮細胞與脂多糖(LPS)共培養(yǎng)情況下,Toll樣受體(TLR4,Toll-like receptor4)、上皮標志物細胞角蛋白(CK7,Cytokeratin7)以及間葉標志物波形蛋白(Vimentin)的表達變化,從而探討TLR4在LPS誘導(dǎo)膽管上皮細胞上皮-間葉樣表型轉(zhuǎn)化中的可能作用。
方法:用最適濃度LPS(2μg/ml)誘導(dǎo)膽管上皮細胞24小時、48小時、72小時,用實時熒光定量PCR檢測目的基因TLR
2、4、CK7、以及Vimentin在mMRA水平的表達變化情況,用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析。
結(jié)果:LPS誘導(dǎo)膽管上皮細胞,不同時間點檢測TLR4、CK7以及Vimentin,實驗結(jié)果顯示:TLR4在LPS刺激24小時后表達明顯上升,48小時達高峰,72小時表達降低,但扔維持較高水平。72小時內(nèi)上皮標志物CK7目的基因在mRNA上表達明顯下降(P﹤0.05),且隨誘導(dǎo)時間的增加而逐漸降低。間葉標志Vimentin目的
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