磁性納米四氧化三鐵及納米金協(xié)同柔紅霉素作用K562-A02細(xì)胞的初步研究.pdf

1、目的：本課題旨在研究磁性納米四氧化三鐵(Nano-Fe<,3>O<,4>)及納米金(Nano-Au)單獨(dú)及結(jié)合柔紅霉素(DNR)應(yīng)用對(duì)人慢性粒細(xì)胞白血病急性紅白血病變細(xì)胞株K562及其耐藥細(xì)胞株K562/A02凋亡的影響，并測(cè)定編碼P糖蛋白(P-gp)的多藥耐藥(MDR)基因mRNA的表達(dá)水平，以探討它們逆轉(zhuǎn)MDR的作用機(jī)理，為載藥納米粒作為耐藥逆轉(zhuǎn)劑的臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。 方法： (1)采用甲基四唑藍(lán)法(MTT)法檢

2、測(cè)DNR，Nano-Fe<,3>O<,4>或Nano-Au單獨(dú)作用于K562/A02細(xì)胞和K562細(xì)胞48h對(duì)細(xì)胞的增殖影響，計(jì)算出其IC50。 (2)采用溶劑擴(kuò)散法制備納米粒，選取了多個(gè)納米材料濃度(6.25％，12.5％，25％，50％，V/V)和多個(gè)DNR濃度(0.05mg/L，0.1mg/L，10mg/L，20mg/L)進(jìn)行組合干預(yù)K562/A02和K562細(xì)胞，采用MTT測(cè)定細(xì)胞增殖，選取抑制效果最佳組。 (3

3、)采用25％納米材料(5.0x10<'*>-7M Nano-Fe<,3>O<,4>或者2.0×10<'*>-8M Nano-Au)和10mg/L DNR結(jié)合物干預(yù)K562/A02細(xì)胞48h，另外設(shè)有l(wèi)Omg/L DNR單藥組，并用流式細(xì)胞儀(FCM)和共居焦熒光顯微鏡檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)DNR濃度、細(xì)胞凋亡、采用半定量PCR(RT-PCR)測(cè)定細(xì)胞MDRl基因mRNA表達(dá)水平。 結(jié)論： (1)載藥納米?？纱龠M(jìn)DNR進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，提高