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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:觀察犬骨髓基質(zhì)干細(xì)胞在多孔鉭材料表面附著與增殖情況并植入犬體內(nèi)進(jìn)行生物相容性研究。
方法:原代提取犬骨髓基質(zhì)干細(xì)胞,應(yīng)用流式細(xì)胞檢測(cè)儀檢測(cè)細(xì)胞表面CD90、CD44及CD34蛋白,鑒定區(qū)別細(xì)胞類型。體外試驗(yàn)采用MTT法測(cè)定多孔鉭材料對(duì)犬骨髓基質(zhì)干細(xì)胞的毒性,通過掃描電鏡來觀察干細(xì)胞在多孔鉭材料上粘附和生長(zhǎng)情況;體內(nèi)試驗(yàn)通過對(duì)骨缺損動(dòng)物模型植入多孔鉭材料,分別于6周、12周處死實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,將標(biāo)本硬組織切片染色放置顯微鏡下觀察
2、多孔鉭材料與周圍組織的生長(zhǎng)情況。
結(jié)果:體外實(shí)驗(yàn)觀察到犬骨髓基質(zhì)干細(xì)胞與多孔鉭材料聯(lián)合培養(yǎng)5d,多孔鉭材料表面無細(xì)胞附著。聯(lián)合培養(yǎng)10d,細(xì)胞分散在多孔鉭材料表面,細(xì)胞間無連接。聯(lián)合培養(yǎng)15d,細(xì)胞連接成片,可見細(xì)胞分泌大量膠原纖維。體內(nèi)試驗(yàn)觀察到6周多孔鉭材料周圍出現(xiàn)大量骨髓基質(zhì)干細(xì)胞,12周多孔鉭材料空隙內(nèi)有骨細(xì)胞及纖維組織出現(xiàn)。
結(jié)論:最終證實(shí)我們提取的細(xì)胞確實(shí)為骨髓基質(zhì)干細(xì)胞;MTT實(shí)驗(yàn)明確多孔鉭材料無細(xì)胞毒
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