具有抗南方水稻黑條矮縮病活性的藥物小分子與水稻體內(nèi)防御基因及PR-1a蛋白的相互作用研究.pdf

1、植物受外界刺激后，PR-1a基因能被大量地誘導(dǎo)表達(dá)，PR-1a基因表達(dá)量的變化與植物的抗病性密切相關(guān)，說明PR-1a基因在植物抗病過程中起著非常重要的作用。在感染煙草花葉病毒(Tobacco mosaic virus, TMV)的煙草上噴施毒氟磷和寧南霉素，能使PR-1a基因的表達(dá)量上調(diào)，從而誘導(dǎo)煙草產(chǎn)生抗病性。田間藥效試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，毒氟磷和寧南霉素具有一定的抗南方水稻黑條矮縮病病毒(Southern rice black streaked

2、 dwarf virus, SRBSDV)的活性，毒氟磷和寧南霉素是否也是通過調(diào)控PR-1a基因表達(dá)量的變化而誘導(dǎo)水稻產(chǎn)生抗病性還未見報(bào)道。病程相關(guān)蛋白(Pathogenesis-related proteins, PRs)是一類水溶性蛋白，其中PR-1a蛋白是植物抗病過程中的關(guān)鍵蛋白，研究PR-1a蛋白與抗病毒劑之間的相互作用具有重要的意義。
　　本論文采用熒光定量PCR的方法研究了不同時(shí)間條件下毒氟磷和寧南霉素對感SRBSDV

3、水稻體內(nèi)PR-1a基因表達(dá)量的影響；采用原核表達(dá)的方法，誘導(dǎo)表達(dá)了PR-1a蛋白，對PR-1a蛋白進(jìn)行了變性，純化和復(fù)性，并用高分辨質(zhì)譜鑒定了PR-1a蛋白；采用熒光光譜法和等溫滴定量熱法(Isothermal titration calorimetry, ITC)研究了寧南霉素、香菇多糖、毒氟磷、GUJHZX-039、GUJHZX-023和GUJHZX-027等抗病毒劑與PR-1a蛋白之間的相互作用。
　　研究結(jié)果表明，毒氟磷和

4、寧南霉素能誘導(dǎo)PR-1a基因表達(dá)上調(diào)，且毒氟磷誘導(dǎo)PR-1a基因表達(dá)上調(diào)的能力比寧南霉素強(qiáng)。第1 d和第3 d時(shí)，PR-1a基因的表達(dá)量上升，這是因?yàn)檫@時(shí)水稻受藥劑和病毒的雙重刺激，但在第5 d的時(shí)候，表達(dá)量又下降，這是因?yàn)樗巹┮种屏瞬糠植《镜臄U(kuò)增，第7 d的時(shí)候表達(dá)量又上升，這是因?yàn)樗巹┑乃幮Ы档停幢灰种频牟《居珠_始擴(kuò)增，使PR-1a基因的表達(dá)量又出現(xiàn)上調(diào)的趨勢。熒光滴定和ITC的數(shù)據(jù)結(jié)果表明，毒氟磷和PR-1a蛋白的結(jié)合力較強(qiáng)，G