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文檔簡介
1、 本實驗室以往工作已確定了約31.3kb的依博素生物合成基因簇(GeneBankAccessionNumber：AY131229)，其中包含22個開放閱讀框(ste1-ste22)，序列分析發(fā)現(xiàn)其中六個開放閱讀框參與了核苷酸糖前體的合成(ste6,ste10,ste1l,ste16,ste17andste19)，四個開放閱讀框可能為糖基轉(zhuǎn)移酶(ste5,ste7,ste15,ste22)編碼基因。 為了進(jìn)一步證明ste6參與依博素
2、的生物合成，我們通過同源交換對基因ste6進(jìn)行了基因阻斷實驗，分別構(gòu)建了基于同源單交換的重組質(zhì)粒pLH1327和同源雙交換的重組質(zhì)粒pLH1327，對鏈霉菌139進(jìn)行轉(zhuǎn)化，分別獲得ste6阻斷突變株LH9827和LH9828，通過Southern雜交證明ste6基因被成功阻斷。我們同時還構(gòu)建了用于回復(fù)實驗的質(zhì)粒pLH9828，對同源雙交換阻斷突變株鏈霉菌LH9828進(jìn)行轉(zhuǎn)化得到ste6回復(fù)株LH9829。對突變株和回復(fù)株產(chǎn)生的胞外多糖進(jìn)
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