銅綠假單胞菌mucA突變分析及N-乙酰半胱氨酸影響生物被膜形成研究.pdf

1、　 本研究首先從銅綠假單胞菌臨床分離株中，篩選非粘液型菌株8株，粘液型菌株50株，用比色法測量兩種菌株的藻酸鹽合成量；PCR-SSCP和基因測序法檢測藻酸鹽合成調(diào)節(jié)基因，位于染色體68min處的mucA基因突變與細(xì)菌菌落形態(tài)的關(guān)系；進(jìn)一步用亞致死量H2O2作為誘變劑對臨床分離的3株非粘液型菌株進(jìn)行誘導(dǎo)mucA基因突變，同時用掃描電鏡(SEM)觀察H2O2對細(xì)菌形成生物被膜的影響。實(shí)驗(yàn)中引入抗氧化劑N-乙酰半胱氨酸(NAC)，觀察其是否可

2、以對抗過氧化氫，阻止mucA基因的誘導(dǎo)突變，同時SEM觀察NAC對生物被膜形成的影響；最后用MTT法計數(shù)生物被膜中細(xì)菌數(shù)量，來觀察NAC與左氧氟沙星(LFX)聯(lián)合應(yīng)用對銅綠假單胞菌生物被膜的影響。　　分析了過氧化氫誘導(dǎo)細(xì)菌基因突變的實(shí)驗(yàn)中，發(fā)現(xiàn)1株非粘液型臨床分離PAmucA基因發(fā)生了突變，另外2株則未檢測到突變，突變位點(diǎn)為352位C→T單堿基置換，在352位提前出現(xiàn)終止密碼子的特性。　　總結(jié)了單用LFX須1MIC以上濃度才能使BF