苦參生物堿的吸脫附研究及氧化苦參堿的分離.pdf

1、本文主要對(duì)苦參生物堿在大孔樹脂上的吸脫附行為進(jìn)行研究，包括吸附等溫曲線、吸附動(dòng)力學(xué)行為及動(dòng)態(tài)吸脫附過程等;并以溶劑萃取的苦參總堿為原料，采用大孔樹脂柱層析法分離其中的氧化苦參堿，重點(diǎn)考察了各工藝條件對(duì)分離效果的影響。
　　 首先，考察了苦參生物堿的分析檢測(cè)方法。鑒于檢測(cè)方法應(yīng)符合快速、靈敏、準(zhǔn)確的原則，考慮到實(shí)驗(yàn)室已有苦參堿標(biāo)樣和氧化苦參堿標(biāo)樣，我們提出了采用酸堿滴定法、TLC、HPLC和GC-MS四種方法對(duì)苦參生物堿進(jìn)行定性、

2、定量分析的方案。首先采用酸堿滴定法對(duì)溶劑提取的苦參總堿進(jìn)行含量測(cè)定，并對(duì)總堿進(jìn)行HPLC分析，其次在苦參生物堿的吸脫附研究中，采用TLC對(duì)分離樣品進(jìn)行定性和半定量分析。在氧化苦參堿的分離中，采用HPLC跟蹤檢測(cè)洗脫樣品，并采用GC-MS對(duì)樣品中的氧化苦參堿進(jìn)行準(zhǔn)確定量。
　　 其次，采用溶劑萃取法從苦參中得到苦參總堿，通過酸堿滴定，確定了苦參總堿的收率為0.803％，HPLC分析發(fā)現(xiàn)，總堿中成分復(fù)雜，苦參堿的保留時(shí)間為10.09

3、9min，含量?jī)H為5.06％，氧化苦參堿的保留時(shí)間為14.953min，含量為21.08％。另外，保留時(shí)間在12.6min附近具有較強(qiáng)吸收峰的物質(zhì)，經(jīng)查閱文獻(xiàn)確定為氧化槐果堿，含量為5.56％。
　　 再次，對(duì)苦參生物堿在大孔樹脂上的吸脫附進(jìn)行研究。首先，從九種大孔樹脂中篩選出適合吸附苦參生物堿的H103樹脂，其吸附率為85.86％，通過研究苦參生物堿在H103大孔樹脂上的吸附等溫曲線和吸附動(dòng)力學(xué)行為，發(fā)現(xiàn)其符合Freundli

4、ch方程，所選出的H103大孔樹脂具有很大的飽和吸附量，吸附能力較強(qiáng)。吸附過程符合二級(jí)動(dòng)力學(xué)方程，吸附平衡在100min內(nèi)就可達(dá)到，吸附速度較快，進(jìn)一步確定了所篩選出的H103大孔樹脂適合后續(xù)的動(dòng)態(tài)吸脫附實(shí)驗(yàn)。動(dòng)態(tài)吸脫附研究發(fā)現(xiàn)，采用梯度洗脫，以30％乙醇-25％氨水(115∶1，v/v)、80％乙醇為洗脫劑，苦參堿和氧化苦參堿可以很好的分離。經(jīng)計(jì)算苦參堿的收率為90.1％，氧化苦參堿的收率為85.3％。
　　 最后，篩選出對(duì)苦

5、參總堿吸附性能較好的H103樹脂，利用大孔樹脂柱層析法從苦參總堿中分離氧化苦參堿。確定了分離氧化苦參堿的洗脫劑為30％乙醇-25％氨水(115∶1，v/v)。對(duì)不同工藝條件下所得的樣品進(jìn)行HPLC分析，最終得出最優(yōu)的柱層析工藝條件:H103樹脂采用乙醇濕法裝柱，樹脂柱的高徑比選為33∶1，30％乙醇-25％氨水(115∶1，v/v)為洗脫劑以2.0mL/min的流速洗脫。為了進(jìn)一步確定樣品中氧化苦參堿的準(zhǔn)確純度，又對(duì)樣品作了GC-MS分