在毛細管電泳中應用移動反應界面法富集和檢測大鼠血漿中的氧化苦參堿和苦參堿.pdf

1、毛細管電泳(CE) 是近年來發(fā)展迅速的新型分析分離技術(shù)。與液相色譜和薄層層析相比，毛細管電泳具有速度快，分離度高，上樣量小等優(yōu)點。這一檢測技術(shù)被廣泛應用于生物、醫(yī)藥、化工、環(huán)境等領(lǐng)域。但是由于毛細管的尺寸限制了檢測靈敏度，導致檢出限（LOD）無法達到其它一些色譜技術(shù)的水平。例如，毛細管的體積限制了樣品的上樣量。另外，由于檢測光路太短，影響了常用的光學檢測方法，如紫外檢測的效果。 為了適應低濃度樣品分離測定的要求，近幾年在毛細管區(qū)

2、帶電泳中發(fā)展了許多在線富集的技術(shù)。通過設(shè)計方法壓縮毛細管中的樣品條帶，這些技術(shù)可以增加樣品注射的體積而不影響分離效率。本文首先介紹了毛細管區(qū)帶電泳中在線富集的若干方法，及其作用機制和應用。其次結(jié)合移動反應界面（MRB）這一樣品在線富集技術(shù)，將這一技術(shù)應用到生物堿的檢測和富集中。 實驗采用建立在移動反應界面理論上的體系進行大鼠血漿中氧化苦參堿和苦參堿的富集與定量檢測。與傳統(tǒng)的毛細管電泳相比，體系中引入了富集相和分離相。最優(yōu)化的條件

3、如下：20 mM HCOONa（用氨水調(diào)節(jié)pH至10.70）樣品緩沖溶液，40 mM HCOOH-HCOONa（pH 2.60）富集緩沖溶液，100 mM HCOOH-HCOONa (pH 4.80) 分離緩沖液， 3 min 樣品相上樣，氧化苦參堿和苦參堿的檢出限分別為1.03和0.38 μg/mL。在不到20分鐘的操作時間內(nèi)富集倍數(shù)提高到原來的60倍。氧化苦參堿在1.30-65.00 μg/mL的濃度范圍內(nèi)，苦參堿在0.84-42.