乙型肝炎病毒全長基因擴增技術的建立及其在探討宮內傳播機理中的初步應用.pdf

1、目的:乙型肝炎病毒(HBV)基因組具有很高的變異性,許多HBV攜帶者個體內都存在不同的HBV基因株(即多樣性或異質性),不同株的病毒復制水平、免疫原性和傳播特點等均不同,對疾病的發(fā)展和轉歸的影響也不同,為清晰的了解HBV基因在母嬰體內異質性的具體狀況,探索HBV基因變異與宮內傳播的關系,該研究建立了乙型肝炎全長聚合酶鏈反應(Full-length PCR),可以直接從血清中一次克隆HBV全基因,在此基礎上,對HBVsAg陽性孕婦及其新生

2、兒體內HBV前S/S基因進行了序列分析.結論:①HBV全長聚合酶鏈反應目的產物帶清晰,重復性穩(wěn)定,所獲HBV全 長克隆經(jīng)PCR、酶切、測序三種方法鑒定,均證實為HBV全長克隆、表明HBV全長基因擴增技術的建立是成功的,但這種方法更適用于對高拷貝模板的擴增.②發(fā)生宮內傳播的孕婦較未發(fā)生宮內傳播的孕婦體內HBV前S/S區(qū)基因異質性高,堿基突變率亦顯著增高,說明孕婦體內HBV基因異質性增高可能較易發(fā)生宮內傳播.③新生兒體內HBV前S/S基因與