漢坦病毒基因分型及其核苷酸序列特征分析.pdf

1、目的：研究黑龍江省、吉林省和內(nèi)蒙古自治區(qū)野外優(yōu)勢(shì)鼠種黑線姬鼠和大林姬鼠中漢坦病毒的基因型,建立一種擴(kuò)增全S片段的方法,用以明確基因亞型及其進(jìn)化,闡明漢坦病毒的遺傳特征,為該地理區(qū)域腎綜合征出血熱的預(yù)防控制提供科學(xué)依據(jù)；研究沈陽一起實(shí)驗(yàn)動(dòng)物Wistar大鼠感染漢坦病毒的基因類型以及當(dāng)?shù)睾旨沂蠛湍I綜合征出血熱病人中漢坦病毒的基因型別及其特征,建立擴(kuò)增全M片段的方法,為分析漢坦病毒與宿主的關(guān)系提供有力證據(jù)。 方法：捕獲鼠類嚙齒動(dòng)物,鑒

2、定鼠種,取鼠肺液氮中保存,用間接免疫熒光法檢測鼠肺中漢坦病毒抗原及漢坦病毒IgM和IgG抗體,提取陽性鼠肺中病毒RNA,采用RT-PCR的方法擴(kuò)增漢坦病毒S,M片段序列,對(duì)序列進(jìn)行系統(tǒng)發(fā)生學(xué)分析,同時(shí)采用Vero-E6細(xì)胞分離病毒。 結(jié)果：黑龍江、吉林和內(nèi)蒙古自治區(qū)三地黑線姬鼠和大林姬鼠共擴(kuò)增出11份陽性標(biāo)本,用全S片段構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)生樹表明其攜帶漢坦病毒漢灘型的兩個(gè)亞型,HTNV6和HTNV7。建立從鼠肺直接擴(kuò)增全s片段的RT-P

3、CR方法。從黑線姬鼠中分離到一株漢坦病毒HAal.74。沈陽三個(gè)單位實(shí)驗(yàn)用大白鼠(Wistar鼠)共計(jì)57只,其中抗原陽性標(biāo)本26份,流行性出血熱病人血清27份,褐家鼠陽性標(biāo)本15份,通過部分S,M片段以及全S,M序列構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)生樹分析表明沈陽市主要是家鼠型疫區(qū),病毒主要存在漢城型S1和S3這兩個(gè)亞型。建立從鼠肺直接擴(kuò)增全M片段的方法。從實(shí)驗(yàn)用大白鼠(Wistar鼠)分離到一株漢坦病毒W(wǎng)istar41。 結(jié)論：東北地區(qū)黑線姬鼠和