山羊callipyge基因單核苷酸多態(tài)研究.pdf

1、長(zhǎng)期以來(lái)，由于社會(huì)和經(jīng)濟(jì)等各方面的原因，肉用山羊的育種工作十分薄弱，山羊“雙肌”性狀候選基因的研究更是落后于其它畜禽。我國(guó)有20多個(gè)地方山羊品種，除少數(shù)幾個(gè)山羊品種如遼寧絨山羊、內(nèi)蒙古絨山羊和濟(jì)寧青山羊等屬于專門化的品種外，其余大都屬于普通山羊品種。四川南江黃羊是我國(guó)經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期選育所培育成功的目前表現(xiàn)較好的肉用山羊品種，但與南非的波爾山羊相比，其肉用性能還相差甚遠(yuǎn)。波爾山羊原產(chǎn)于南非，是世界著名的肉用山羊品種，具有繁殖力高、生長(zhǎng)發(fā)育快、抗

2、逆性強(qiáng)、適應(yīng)性廣、肉用性能好以及種用價(jià)值高等特點(diǎn)，尤其是其頸部、胸部、肩部、背部、腰部、臀部和四肢肌肉豐滿，是山羊中明顯具備“雙肌”特征的山羊品種。我國(guó)自1995年開(kāi)始引入波爾山羊以來(lái)，在全國(guó)各地的純繁和雜交改良中均取得了顯著效果，為進(jìn)一步的肉用山羊育種工作奠定了良好基礎(chǔ)。因此，在這一基礎(chǔ)之上，利用現(xiàn)代分子生物學(xué)方法和手段，進(jìn)一步研究和探討波爾山羊“雙肌”性狀的分子生物學(xué)基礎(chǔ)，對(duì)指導(dǎo)我國(guó)肉用山羊的育種工作具有重要的理論和實(shí)踐意義。

3、 本實(shí)驗(yàn)參照GenBank上發(fā)表的綿羊Callipyge基因序列(Accession No.AF401294)的引物，擴(kuò)增了59個(gè)波爾山羊個(gè)體的Callipyge基因片段，并選擇15個(gè)個(gè)體進(jìn)行測(cè)序，測(cè)序得到493bp長(zhǎng)的序列，用BioEdit7.0軟件進(jìn)行序列比對(duì)發(fā)現(xiàn)一個(gè)SNP位點(diǎn)184C→T。利用Webcutter2.0尋找184C→T的限制性內(nèi)切酶。然后對(duì)國(guó)內(nèi)18個(gè)地方山羊品種和4個(gè)國(guó)外山羊品種以及波爾山羊后代共計(jì)22個(gè)品種101

4、9個(gè)個(gè)體進(jìn)行Callipyge基因PCR擴(kuò)增，并通過(guò)限制性內(nèi)切酶Fok工進(jìn)行PCR-RFLP分析，對(duì)山羊Callipyge基因型進(jìn)行檢測(cè)。 在遼寧絨山羊、承德無(wú)角山羊、太行山羊、陜南白山羊、成都麻羊、川東白山羊、貴州白山羊、馬頭山羊、隆林山羊、薩能山羊、奴比山羊、吐根堡山羊等群體中，僅存在CC基因型個(gè)體，未發(fā)現(xiàn)CT和TT基因型個(gè)體。在濟(jì)寧青山羊、內(nèi)蒙古絨山羊、建昌黑山羊、藏山羊、南江黃羊、宜昌白山羊、都安山羊、雷州山羊、波爾山羊

5、等品種中發(fā)現(xiàn)CC和CT兩種基因型，而且所有的TT基因型個(gè)體均存在于波爾山羊群體中。在波爾山羊群體中，T基因頻率和CT基因型頻率均為最高，分別為為0.3010和0.2537。在濟(jì)寧青山羊、內(nèi)蒙古絨山羊、建昌黑山羊、藏山羊、南江黃羊、宜昌白山羊、都安山羊、雷州山羊中，T基因頻率在0.0125～0.0667之間，CT基因型的基因型頻率在0.0250～0.1333之間。在22個(gè)山羊群體中CC基因型占絕對(duì)優(yōu)勢(shì)。Hardy-weinberg平衡檢驗(yàn)

6、表明，在184C—T位點(diǎn)上所有22個(gè)群體均處于Hardy-weinberg平衡狀態(tài)(P>0.05)。通過(guò)一般線性模型，Y=μ+β+S+L+T+P+M+G+e，其中B、S、L、T、P、M和G分別代表每個(gè)個(gè)體的品種、性別、胎次、胎型、父母基因型，u和e分別代表群體均數(shù)和誤差，用SPSS version 13.0軟件，對(duì)67個(gè)波爾山羊及其247個(gè)后代進(jìn)行分析，分析不同年齡的山羊CL26基因型對(duì)體重的影響。結(jié)果表明，在初生和一周齡時(shí)，其體重主要

7、受父親的CC基因型影響，在二周齡、三周齡、一月齡和二月齡時(shí)，其體重同時(shí)受父親的CC基因型和母親的CT基因型影響，在三月齡和四月齡時(shí)，其體重還是主要受父親的CC基因型影響。由此，我們推測(cè)，CC型的公山羊和攜帶Callipyg基因的雜合型母山羊雜交產(chǎn)生的子代在各年齡階段的體重都較高，從而影響雙肌的性狀。因此，Callipyg基因可能作為山羊雙肌性狀的一個(gè)候選基因，而SNP184C→T變異位點(diǎn)可以作為檢測(cè)Callipyge基因型的分子標(biāo)記。