COX-2基因單核苷酸多態(tài)性與COPD相關(guān)性研究.pdf

1、背景:慢性阻塞性肺疾病(Chronic obstructive pulmonary disease,COPD)以氣流受限為特征,其氣流受限不完全可逆[1]。吸煙是目前非常明確的與慢性支氣管炎和阻塞性肺功能受損相關(guān)的環(huán)境因素,它能夠增加氣道反應(yīng)性使肺功能迅速下降[2]。長期吸煙者易受煙草煙霧的影響使FEV1下降速率是正常年齡下降速率的3-5倍[3,4],但是僅有25％慢性吸煙者最終發(fā)展成為COPD[5]。這說明除吸煙外,遺傳因素在COPD

2、發(fā)生發(fā)展及嚴重程度中可能起重要作用[6]。香煙煙霧可能通過刺激呼吸道上皮細胞和免疫細胞釋放促炎性細胞因子,從而上調(diào)各種炎癥相關(guān)基因,例如環(huán)氧合酶-2(cyclooxygenase-2, COX-2)基因[7]。COX-2是促炎癥誘導因子,是炎癥反應(yīng)過程中細胞參與的特征性因子,同時也是促炎癥因子、生長因子及細菌脂多糖的誘導酶[8,9]。COX-2反應(yīng)產(chǎn)物可引起細胞毒性、神經(jīng)毒性甚至是細胞死亡[10]。COX-2反應(yīng)產(chǎn)物誘導細胞損傷的機制之

3、一是在COPD患者中COX-2在合成前列腺素E2(prostaglandinE2, PGE2)和其他炎癥介質(zhì)的同時產(chǎn)生氧自由基[10,11]。
　　基因表達水平在人類中是高度遺傳的[12,13],且單核苷酸多態(tài)性(Single nucleotide polymorphisms, SNP)影響基因表達水平[14,15]。SNP在人類基因庫中很常見,而且已經(jīng)證實一些SNP與個體病理生理特性密切相關(guān),例如對藥物的敏感性和遺傳性疾病的死亡

4、率等都有關(guān)系[16,17]。COX-2基因啟動子編碼區(qū)-765G/C(rs20417)SNP與抑郁癥[18]、乳腺癌[19]、胃癌[20]、鼻咽癌轉(zhuǎn)移[21]及其他腫瘤[22]的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。另外,在吸煙者肺中,煙草煙霧能夠誘導COX-2表達,這是眾多與COPD發(fā)病機制相關(guān)的潛在性危險因素中的一種危險因素[23]。rs20147位點多態(tài)性能夠改變轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合區(qū)活性。有文獻報道體外實驗證明-765C等位基因與野生型-765G等位基因相

5、比,它能夠使啟動子活性降低30％[24]。環(huán)氧合酶(cyclooxygenase,COX)產(chǎn)物活性在COPD發(fā)病機制中盡管不起關(guān)鍵性作用,但有重要作用[25]。最近有報道證明-765C等位基因在COPD患者中吸煙耐受者更常見,這說明降低COX-2活性可能會阻止吸煙者中COPD的發(fā)展[26]。有趣的是另一篇文獻報道發(fā)現(xiàn)與純合子GG基因型相比,攜帶CC或GC基因型能夠顯著降低COPD發(fā)病風險。這種等位基因標記的基因分型可能具有傳達識別致病基

6、因的巨大潛力,定義藥物靶點和建立個體標記藥物[27]。因此,COX-2基因啟動子區(qū)-765G/C多態(tài)性與COPD發(fā)病機制是否相關(guān)是值得探究的問題。
　　目的:探究COX-2基因單核苷酸多態(tài)性位點-765G/C(rs20417)與常州地區(qū)漢族人群中慢性阻塞性肺疾病易感性的關(guān)系。
　　方法:采用病例對照研究方法,分別收集常州地區(qū)漢族人群中COPD患者138例和健康對照組83例的抗凝全血標本,用3S血液基因組DNA抽提試劑盒提取全

7、血DNA,運用聚合酶鏈反應(yīng)(polymerase chain reaction,PCR)擴增COX-2基因的相關(guān)片段,將PCR產(chǎn)物直接進行DNA測序分析,測序結(jié)果在基因庫中進行序列比較。
　　結(jié)果:(1)病例組和對照組中rs20417位點基因型及等位基因頻率分布比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。(2)卡方檢驗分析顯示:COX-2基因rs20417位點不同基因型的COPD發(fā)生相對危險度比較,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),攜帶