PLAG1轉(zhuǎn)基因小鼠多形性腺瘤干細(xì)胞的分離和鑒定.pdf

1、上海交通大學(xué)博士學(xué)位論文PLAG1轉(zhuǎn)基因小鼠多形性腺瘤干細(xì)胞的分離和鑒定姓名：沈淑坤申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：口腔臨床醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師：張陳平20090501卜海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院博士學(xué)位論文◎19系、42系和104系的繁殖后代臨床特點(diǎn)、組織病理學(xué)和建立初期類似，仍可模擬人類多形性腺瘤，但有惡性傾向，免疫組化染色發(fā)現(xiàn)腫瘤組織中CD44、CDl33、CDl17、Egr1、cMyc、CyclinD1表達(dá)明顯較瘤旁和正常組織增強(qiáng)。2流式檢測(cè)發(fā)現(xiàn)42系腫

2、瘤細(xì)胞中CD44較正常頜下腺細(xì)胞表達(dá)增加，若將CD44染色細(xì)胞分為3側(cè)亞群，CD44m、CD44n和CD44neg，則CD44m側(cè)亞群細(xì)胞在腫瘤細(xì)胞所占比例約862％，平均熒光強(qiáng)度為8959，明顯高于轉(zhuǎn)基因未成瘤小鼠和正常野生型頜下腺細(xì)胞(PO05)，而CD44m側(cè)亞群中CDl33和CDl17共染細(xì)胞的百分比明顯較CD44n銘在細(xì)胞側(cè)亞群高，有明顯差異(PO05)。342系成瘤小鼠BrdU實(shí)驗(yàn)和CD44染色發(fā)現(xiàn)在觀察時(shí)間內(nèi)BrdU染色的

3、CD44M細(xì)胞較CD44眥g的細(xì)胞數(shù)量明顯減少。442系體內(nèi)成瘤實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)C57BL／6野生型小鼠皮下注射經(jīng)過CD44M分選下來的腫瘤細(xì)胞500個(gè)即可成瘤。5Egr1啟動(dòng)子和PLAGl的質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)隨著PLAGl濃度增加，熒光素酶活性增強(qiáng)。結(jié)論1PLAGl轉(zhuǎn)基因小鼠的頜下腺腫瘤模擬了人類多形性腺瘤，但有惡性傾向。242系PLAGl轉(zhuǎn)基因小鼠模型表達(dá)CD44的腫瘤細(xì)胞較正常頜下腺細(xì)胞多，且其中Brdlf的著色細(xì)胞少提示在觀察時(shí)間內(nèi)CD