淫羊藿素對肝臟缺血再灌注損傷保護作用的實驗性研究.pdf

1、[研究背景和目的]肝臟具有門靜脈和肝動脈兩套血供系統(tǒng)。其中,門靜脈占入肝血流的70％-80％,肝動脈僅占20％-30％。肝臟獨特的解剖結(jié)構(gòu)特點,決定了肝臟較其他一些臟器的血流更為豐富。在現(xiàn)代肝臟外科手術(shù)中,對肝十二指腸韌帶內(nèi)肝固有動脈和門靜脈主干進行阻斷,能夠大大減少術(shù)中出血。這種被稱為"Pringle"的手法,從首次在動物實驗中獲得成功到今天被廣泛運用于臨床已有近百年的歷史。雖然該法操作簡單、很大程度上控制了肝創(chuàng)面的出血,但同時也極易

2、引起肝臟的缺血再灌注損傷(IRI),而IRI也是導(dǎo)致肝臟切除術(shù)后肝功不全和肝移植術(shù)后肝原發(fā)性無功能的主要原因之一。如何在既減少肝臟手術(shù)切除造成的大量失血的同時,又能減輕肝門阻斷帶來的缺血再灌注損傷,是肝臟外科臨床中亟待解決的重要問題。 目前應(yīng)用于臨床保護肝臟損傷的藥物品種較多,但療效均不十分理想。多種藥物聯(lián)合應(yīng)用可能會有助于術(shù)后肝功能的恢復(fù),但作用有限,且藥物總量的增加勢必會加重肝臟代謝的負擔,甚至?xí)a(chǎn)生肝臟毒性作用。因此,進一

3、步研發(fā)能夠更有效地改善術(shù)后肝臟功能,毒副作用少的新一代藥物,無疑具有十分重要的臨床價值。 淫羊藿素(Icaritin),分子量368,是由天然植物淫羊藿(Epmedium)中提取的黃酮類單體化合物。已有研究表明：淫羊藿素具有誘導(dǎo)細胞增殖分化、擴張心腦血管、抗腫瘤、類雌激素、提高性機能以及抗骨質(zhì)疏松等作用。基于對同類化合物的研究以及淫羊藿素分子結(jié)構(gòu)的相關(guān)分析提出以下猜測：淫羊藿素依靠清除氧自由基(ROS)、抗脂質(zhì)過氧化以及促進內(nèi)皮

4、型一氧化氮合成酶(eNOS)的表達,增加NO的分泌來發(fā)揮對缺血再灌注損傷器官的保護作用。本研究采用藥物預(yù)處理的方式,通過建立大鼠肝臟缺血再灌注損傷模型以證實如上假說,為能夠行之有效地解決前述臨床問題在基礎(chǔ)研究領(lǐng)域做一次新的嘗試。 [研究方法] 1.淫羊藿素脂質(zhì)體的制備：采用薄膜分散法將淫羊藿素粉劑制備為淫羊藿素脂質(zhì)體,供動物實驗用。 2.動物實驗：選取健康雄性SD大鼠,隨機分為淫羊藿素脂質(zhì)體組(A)、空白脂質(zhì)體組

5、(B)、單純損傷組(C)以及假手術(shù)組(D)。除假手術(shù)組外,所有大鼠70％肝臟(肝左葉和肝中葉)的血流阻斷60min,之后血流重新恢復(fù)。于再灌注2h和6h采集大鼠血液及肝組織標本,進行以下檢測：1)血清ALT、AST含量；2)肝組織中丙二醛(MDA)和NO含量；3）肝組織中超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮合成酶(NOS)、誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶(iNOS)、eNOS以及髓過氧化物酶(MPO)活力；4）肝臟病理組織形態(tài)學(xué)；5）肝細胞凋亡指數(shù)

6、(AI)。 [研究結(jié)果] 1.經(jīng)初步評價淫羊藿素脂質(zhì)體中脂質(zhì)體含量高、藥物包封良好,已能滿足動物實驗中靜脈注射所需。 2.動物實驗結(jié)果 (1)再灌注2h,A組中的ALT、MDA、MPO以及AI較B、C兩組有明顯下降； (2)再灌注6h,A組中的ALT、AST、MDA和AI較B、C兩組有明顯降低,同時SOD、NOS、eNOS水平則顯著升高； (3)不同再灌注時間點,病理組織形態(tài)學(xué)觀察的肝臟損