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文檔簡介
1、本文以貴州大學農(nóng)業(yè)生物工程研究院保存的矮化突變體試管苗為材料,經(jīng)過離體培養(yǎng)體系得到了該矮化突變體的回復突變體,并從形態(tài)學角度對這兩份材料進行了鑒定;通過赤霉素(GA3)含量測定及GA3應答試驗對矮化突變體D的矮化及回復機制進行了初探;利用ISSR分子標記,檢測了矮化突變體的遺傳穩(wěn)定性及其與野生型的遺傳差異;并從表觀遺傳學角度對材料的DNA甲基化程度進行了檢測,取得的主要結(jié)果如下:
1)矮化突變體D在多次繼代中保持了矮化穩(wěn)定性。
2、以培養(yǎng)40日數(shù)據(jù)為例,不同繼代次數(shù)的矮化突變體株高波動不超過10%,與同時期野生型的株高差距在75%~90%之間。矮化突變體同時還伴隨著刺座突變的性狀,多項證據(jù)表明,D的矮化與刺座突變是兩個相互獨立的突變,他們之間沒有直接關聯(lián)。
2)培養(yǎng)第三代時從矮化突變體D株系中分離出擬回復突變體R,該回復突變體是D在株高水平上的回復,培養(yǎng)40d時株高超過D約69%,與野生型WT不同的是,R保留了與D相同的刺座突變,R株系在后續(xù)繼代中一直保
3、持著這種刺座突變。
3)各代矮化突變體D的GA3含量均低于同時期野生型WT,其中第一代D低于WT19.5%,第五代D低于WT14.5%,達到極顯著水平,同時,通過施加1mol/L的GA3,矮化突變體 D可以在40d內(nèi)回復到WT的株高水平,由此可見,矮化突變體是一種GA3缺陷型矮化體。另外,施加GA3并未D的刺座突變產(chǎn)生影響,D的刺座突變與GA3沒有直接聯(lián)系。
4)經(jīng)過篩選得到28條可以清晰顯示條帶的ISSR引物,一共
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