黃芪及其提取物對體外培養(yǎng)大鼠肺成纖維細胞增殖及KGF、TNF-α表達的影響.pdf

1、目的：通過觀察黃芪及其提取物對體外培養(yǎng)的大鼠肺成纖維細胞增殖及角化生長因子(KGF)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)表達的影響，探討黃芪及其提取物治療肺纖維化的機制，并為開發(fā)其有效成分提供實驗依據(jù)。 方法：(1)將60只SPF級大鼠隨機分為黃芪煎液組，黃芪總皂苷組，黃芪總黃酮組，黃芪多糖組，地塞米松組，生理鹽水組等6組，制備血清。(2)分離、培養(yǎng)并鑒定大鼠肺成纖維細胞，選用生長良好的3代細胞，分為6組：黃芪煎液組，黃芪總皂苷組，

2、黃芪總黃酮組，黃芪多糖組，地塞米松對照組，空白對照組，加入相應(yīng)血清。用形態(tài)學(xué)和免疫組化鑒定成纖維細胞；臺盼藍排斥試驗法測定細胞活力；MTT法檢測細胞抑制率；免疫組化法檢測細胞中KGF的表達；ELJSA法檢測細胞培養(yǎng)液中TNF-α的表達。 結(jié)果：(1)波形蛋白表達陽性，結(jié)合組織來源與細胞生物學(xué)特性確認為肺成纖維細胞；(2)0.4％臺盼藍測定細胞活力>95％；(3)在48～72小時，與空白對照組相比，黃芪煎液組，黃芪總皂苷組，黃芪總

3、黃酮組，地塞米松組對大鼠肺成纖維細胞增殖有明顯的抑制作用(P<0.01)，黃芪多糖組有抑制作用P<0.05)；與地塞米松組相比，黃芪煎液組，黃芪總皂苷組，黃芪總黃酮組無顯著差異(P>0.05)而黃芪多糖組抑制率較低P<0.05)；(4)與空白對照組相比，黃芪煎液組，黃芪總皂苷組，黃芪總黃酮組KGF表達明顯增強P<0.01)，黃芪多糖組及地塞米松組增強(P<0.05)；與地塞米松組相比，黃芪煎液組，黃芪總皂苷組，黃芪總黃酮組KGF表達較強

4、(P<0.05)而黃芪多糖組無顯著差異P>0.05)；(5)與空白對照組相比，黃芪煎液組，黃芪總皂苷組，黃芪總黃酮組TNF-α的表達很低P<0.01)，黃芪多糖組及地塞米松組表達低(P<0.05)；與地塞米松組相比，黃芪煎液組，黃芪總皂苷組，黃芪總黃酮組表達低(P<0.05)而黃芪多糖組無顯著差異(P>0.05)。 結(jié)論：1、黃芪及其提取物可以抑制大鼠肺成纖維細胞的增殖，其中黃芪煎液、黃芪總皂苷、黃芪總黃酮的效果明顯優(yōu)于黃芪多糖